«Иммунитет при инфекционных заболеваниях»

[146]

Иммунитет лягушек против бациллы сибирской язвы был рано продемонстрирован и изучен в знаменитом мемуаре Роберта Коха [185] о сибирской язве. Этот исследователь после введения эмульсии селезенки сибирской язвы в лимфатический мешок лягушки извлек бациллы изнутри круглых клеток, которые легко лопались при переносе в воду. Кох, принимая общепринятую тогда точку зрения, полагал, что бациллы находят благоприятную питательную среду в содержимом определенных клеток, но что, несмотря на это, лягушка способна проявлять реальный иммунитет против сибирской язвы. Жибье [186] сделал интересное открытие, что лягушки при воздействии высокой температуры (около 37° C) теряют свой естественный иммунитет и легко заражаются смертельной сибирской язвой.

С тех пор механизм, посредством которого организм лягушки обеспечивает иммунитет против бациллы сибирской язвы, неоднократно изучался. В мемуаре, появившемся в 1884 году [187], я настаивал на том, что главная роль в этом иммунитете принадлежит фагоцитам, которые пожирают введенные бактерии и подвергают их внутриклеточному пищеварению. Круглые клетки, описанные Кохом, — это не что иное, как лейкоциты лимфатического мешка, захватившие бациллы сибирской язвы. Эти бациллы вместо того, чтобы процветать в содержимом клеток, находят там очень неблагоприятную среду и погибают по прошествии более или менее длительного периода. Когда деятельность фагоцитов затрудняется неблагоприятными влияниями, например, высокой температурой, они проявляют очень слабую реакцию, неспособную обеспечить лягушке тот иммунитет, которым она обладает в нормальных условиях. Выводы, которые я только что суммировал, вызвали очень живое противодействие со стороны большого числа наблюдателей. Баумгартен [188] со своими учениками Петрушки [189] и Фаренгольцем [190] пытались доказать, что фагоцитоз не играет никакой роли в иммунитете и что лягушки сопротивляются сибирской язве просто потому, что бациллы неспособны поддерживать свою жизнь в жидкостях этого земноводного. Наттолл [191] из школы Флюгге также утверждал, что лягушки сопротивляются сибирской язве благодаря бактерицидной силе своих жидкостей. Эта точка зрения защищалась рядом других наблюдателей и некоторое время казалась вполне доминирующей.

[147]

Тем не менее можно продемонстрировать, что плазмы лягушки не только не враждебны жизни бациллы, но и служат для нее хорошей питательной средой [192]. Все, что необходимо для демонстрации этого факта, — это ввести под кожу лягушек споры сибирской язвы, заключенные в мешочек из сердцевины тростника или просто завернутые в кусочек фильтровальной бумаги. Плазма лимфатического мешка сразу пропитывает споры и позволяет им прорасти и произвести целое поколение бацилл. Но как только лейкоциты проходят сквозь бумагу, они захватывают молодые бациллы, переваривают их в своем веществе и предотвращают их патогенное действие. Прорастание спор может происходить даже там, где они были введены под кожу лягушки, не будучи никак защищенными. Но в этих условиях прорастает лишь определенное число спор, большинство из которых не успевает сделать это до прибытия лейкоцитов. Мелкие, очень короткие бациллы, которые происходят из проросших спор, вместе со спорами, которые не проросли, вскоре поглощаются фагоцитами. Но в то время как палочки в конечном итоге перевариваются внутри этих клеток, поглощенные споры остаются нетронутыми в течение очень долгого времени: они не прорастают, но и не уничтожаются и сохраняют свою жизнеспособность бесконечно долго, несмотря на влияние фагоцитов. Достаточно извлечь из лягушки, которая была инокулирована спорами сибирской язвы некоторое время назад и содержалась при умеренной температуре (15°–25° C), немного лимфы и засеять ее в любую питательную среду (из тех, что используются при культивировании бактерий), чтобы увидеть, как споры прорастают и производят целое поколение абсолютно нормальных нитевидных бацилл. Все эти явления были тщательно изучены Трапезниковым [193] в работе, выполненной в моей лаборатории. Из его экспериментов очевидно, что фагоциты лягушки вполне способны защитить организм против бациллы сибирской язвы путем поглощения и переваривания бацилл в вегетативном состоянии и путем предотвращения прорастания поглощенных спор. Это фагоцитарное действие очень важно в присутствии того факта, что плазмы лягушки позволяют спорам прорастать, а бациллам — развиваться и производить обильные культуры.

[148]

Иммунитет лягушек против бациллы сибирской язвы, который мы только что описали и который гарантируется активностью фагоцитов, постоянен при вышеупомянутых температурных условиях (15°–25° C), условиях, которые, однако, достаточны, чтобы обеспечить смерть восприимчивых холоднокровных животных, таких как сверчок или морской конек, от сибирской язвы. Съедобная лягушка, вид, который легко приспосабливается к температуре 35° C, сопротивляется даже в этих условиях инфекции бациллой, как указал Мениль в уже цитировавшейся работе при рассмотрении иммунитета рыб. Зеленая лягушка (Rana esculenta) при длительном содержании при этой высокой температуре, столь подходящей для развития бациллы сибирской язвы, реагирует тем же фагоцитарным механизмом. Лейкоциты лимфы и крови, клетки пульпы селезенки и звездчатые клетки Купфера печени захватывают введенные бациллы и переваривают их, как и в любом другом случае фагоцитоза. Бурая лягушка (Rana temporaria) адаптируется лишь незначительно и с большим трудом к высокой температуре и погибает, была ли она инокулирована сибирской язвой или нет. В этих условиях бактерии развиваются в теле мертвых или умирающих лягушек, но Мениль настаивает на том факте, что истинная инфекция сибирской язвой не производится, как утверждал Жибье по результатам своих исследований.

[149]

Диедонне [194], однако, нашел метод снятия естественного иммунитета лягушки против бациллы сибирской язвы путем инокуляции ее искусственной бактериальной расой, которую он адаптировал к развитию довольно пышно при низкой температуре 12° C. В этих условиях все инокулированные лягушки, даже те, которые сопротивлялись инокуляции обычными бактериями (выращенными при 37,5° C), погибли в течение периода от 48 до 56 часов, содержа в крови и органах много бацилл. Диедонне не изучал существенный механизм, который сопровождает эту потерю иммунитета; но весьма вероятно, что, во-первых, мы имеем здесь дело с усилением, специфичным для лягушки, бациллы, которая привыкла развиваться при низкой температуре. Эта бацилла должна размножаться в лягушках, которые содержались при низкой температуре, гораздо быстрее и обильнее, чем обычная бацилла. С другой стороны, восприимчивость лягушек Диедонне должна зависеть от меньшей сопротивляемости организма в условиях его экспериментов. К сожалению, мы не можем найти в его мемуаре достаточных данных по этим пунктам; он даже не указывает температуру, при которой жили лягушки, инокулированные бактериями, адаптированными к холоду. Диедонне ссылается на аналогию своих результатов с теми, что были получены в случае иммунитета и восприимчивости лягушек в отношении септицемической бациллы.

Эта бацилла (Bacillus ranicida) стала предметом интересного исследования Эрнста [195]. Это мелкая, очень тонкая бацилла, которая у лягушек вызывает смертельную болезнь, эпидемическую весной, но полностью прекращающуюся летом. Взяв этот факт за основу, Эрнст преуспел в придании иммунитета лягушкам осенью, поместив их в инкубатор при 25° C. Несмотря на введение значительной дозы мелкой бациллы, лягушки, живущие при этой температуре, оставались в добром здравии, тогда как контрольные животные, подвергнутые воздействию низкой температуры, умирали от септицемии. Контрольный тест был сделан летом. Инокулированные лягушки, которые содержались в лаборатории, оставались незатронутыми, тогда как те, которые содержались в холодильном аппарате при 6°–10° C, неизменно погибали. Можно спросить: это очевидное влияние температуры на иммунитет и восприимчивость оказывается на организм лягушки или на патогенную бациллу? В случае, когда бацилла может развиваться только при низких температурах, ее безвредность при более высокой температуре может быть легко понята. Эксперименты Эрнста, однако, продемонстрировали, что эта мелкая бацилла развивается гораздо лучше при 22° C и даже при 30° C, чем при более низких температурах. Следовательно, необходимо сделать вывод, что высокая температура, которая придает иммунитет, действует не путем ослабления бациллы, а скорее путем усиления сопротивляемости организма. Низкие температуры (6°–10° C), которые благоприятствуют смертельной инфекции, имеют иное действие; то есть они ослабляют реакцию инокулированных лягушек.

[150]

Хотя Эрнст не изучал механизм этой резистентности полностью, из данных, которые он предоставил, очевидно, что она состоит в фагоцитарной реакции. Он смог продемонстрировать поглощение бацилл фагоцитами у восприимчивых охлажденных лягушек, так же как и у рефрактерных лягушек, содержавшихся при более высокой температуре; но в первом случае фагоцитоз был настолько слабым, что через 24 часа после инокуляции значительное число свободных бацилл все еще обнаруживалось в лимфе спинного мешка, тогда как у рефрактерных лягушек гораздо более активный фагоцитоз приводил к исчезновению свободных бацилл в течение первого дня. Если, как весьма вероятно, аналогия этой септицемии с сибирской язвой у лягушек, на которой настаивает Эрнст, действительно существует, необходимо сделать вывод, что восприимчивость этих земноводных к модифицированной расе бациллы зависит от их слабой фагоцитарной резистентности.

Поскольку в этих двух примерах естественного иммунитета у лягушки мы видели, что фагоцитарная активность проявляется в активной форме против бактерий, которые легко развиваются в жидкостях того же животного, мы могли бы сделать вывод, что реакция фагоцитов составляет общий способ защиты у холоднокровных животных. Но Любарш [196], очень осторожный наблюдатель, выразил противоположную точку зрения, основанную на своих исследованиях бациллы мышиной септицемии. Он убедился, что лягушки будут сопротивляться инъекциям даже значительных количеств этой бациллы без какого-либо участия со стороны фагоцитов. Поскольку мы здесь имеем дело с фактом, Мениль (l.c.) взялся проверить эти наблюдения с целью установления, был ли это случай реального исключения или простого недоразумения. Он смог продемонстрировать с помощью неопровержимых наблюдений и экспериментов, что бациллы мышиной септицемии при инокуляции лягушкам вызывают очень выраженный положительный хемотаксис со стороны фагоцитов, которые захватывали и переваривали бациллы точно так же, как они делают это с бациллой сибирской язвы. Это кажущееся исключение, таким образом, превращается в дополнительный аргумент в пользу того, что фагоцитарная реакция является общим фактором иммунитета. В поддержку этой гипотезы я могу привести еще один пример, уже упомянутый в предыдущей главе при обсуждении другого вопроса. Лягушка очень рефрактерна против холерного вибриона. Когда эти вибрионы инокулируются в спинной лимфатический мешок или в любую другую часть тела, животное сохраняет свое здоровье неповрежденным. Исследование экссудата в месте инокуляции демонстрирует, что вибрионы встречают энергичное противодействие со стороны фагоцитов, которые поглощают и полностью переваривают их. Это представляет особый интерес ввиду того факта, что лягушка очень чувствительна к токсину холерного вибриона. При введении в слабой дозе он убивает лягушку очень быстро. Две маленькие лягушки погибли менее чем через час от действия 0,5 куб. см холерного токсина.

[151]

Естественный иммунитет лягушки против холерного вибриона дает, таким образом, пример, в котором организм, уничтожая вибрион путем фагоцитоза, предотвращает выработку яда, который в противном случае неизбежно убил бы его.

Продемонстрировав, что фагоцитарная реакция проявляется у лягушки во всех случаях естественного иммунитета, которые были достаточно изучены, мы должны на мгновение остановиться на вопросе о состоянии бактерий в момент их поглощения фагоцитами. Совершенно очевидно, что эта фагоцитарная защита эффективна только при условии, что она осуществляется против бактерий, которые в ее отсутствие могли бы повредить организму своим размножением и своей вирулентностью. По этой причине широко обсуждался вопрос о том, были ли микроорганизмы перед поглощением живыми и способными производить свое патогенное действие. Было даже высказано предположение, что фагоциты способны поглощать только мертвые тела микроорганизмов, убитых другими агентами. Лягушки очень подходят для изучения этого вопроса. Когда капля экссудата удаляется через некоторое время после инокуляции подвижным организмом, таким как Bacillus pyocyaneus или холерный вибрион, организм часто обнаруживался быстро движущимся внутри вакуолей внутри лейкоцитов. Эксперимент удастся еще полнее, если каплю лимфы лягушки смешать на предметном стекле со следами культуры этих подвижных микроорганизмов, последние вскоре обнаруживаются в прозрачных вакуолях, включенных в лейкоциты, и совершают чрезвычайно быстрые движения.

Помимо этого прямого доказательства, мы можем убедиться в живом состоянии микроорганизмов другим способом. Извлеките каплю экссудата на продвинутой стадии процесса, когда уже нет никаких свободных микроорганизмов; внутри фагоцитов все еще можно увидеть несколько разбросанных бактерий, более или менее хорошо сохранившихся. Достаточно подержать висячую каплю такого экссудата при температуре около 30° C, заботясь о том, чтобы она не высохла, но не добавляя к ней никакой питательной среды. В этих условиях лейкоциты погибают более или менее быстро, но бактерии обретают силу: они начинают размножаться и по прошествии короткого времени производят поколение бактерий внутри мертвого лейкоцита. Размножение бактерий идет прогрессивно, и висячая капля превращается в настоящую чистую культуру. Мениль смог подтвердить эти данные с экссудатами лягушек, которые были инокулированы либо бациллами сибирской язвы, либо бациллами мышиной септицемии.

[152]

Бактерии, поглощенные в живом состоянии фагоцитами, сохраняют свою первоначальную вирулентность. Некоторые авторы думают, и я раньше был этого мнения, что по прошествии более или менее длительного пребывания внутри лейкоцитов бациллы сибирской язвы претерпевают ослабление своей вирулентности. Позже, однако, многочисленные исследования продемонстрировали, что это мнение неверно и что вирулентность сохраняется у бактерий, включенных в фагоциты лягушек, все то время, пока эти бактерии остаются живыми. Диедонне настаивал на этом факте в отношении бациллы сибирской язвы. Мениль подтвердил это для того же вида и для бациллы мышиной септицемии. Невозможно, следовательно, сомневаться в этом общем результате, что лягушки, которые рефрактерны против определенных бактерий, сопротивляются из-за фагоцитоза, который осуществляется против живых и вирулентных микроорганизмов.

Мы достаточно настаивали на анализе естественного иммунитета лягушки и не должны задерживаться на фактах, относящихся к другим земноводным, которые, к тому же, изучались гораздо меньше. Рептилии, эти высшие представители позвоночных, называемые холоднокровными, часто представляют примеры действительно замечательного иммунитета. Так, аллигаторы сопротивляются огромным дозам различных бактерий, таких как бацилла сибирской язвы, бацилла туберкулеза человека или коккобацилла брюшного тифа. Когда через некоторое время после инъекции экссудат в месте инокуляции извлекается, обнаруживается большое количество лейкоцитов, среди которых можно распознать много эозинофильных микрофагов, хотя большинство составляют макрофаги с одним, двумя или более ядрами. В экссудате обнаруживаются действительно гигантские клетки. Именно макрофаги особенно проявляют фагоцитоз, и их часто находят набитыми введенными бактериями, в чем я смог убедиться после инъекций коккобацилл брюшного тифа. Естественный иммунитет аллигаторов (Alligator mississipiensis) сохраняется не только при температуре инкубатора (37° C), но и при комнатной температуре (20°–22° C).

[153]

Рассматривая животный мир, мы должны на мгновение остановиться, чтобы рассмотреть естественный иммунитет птиц или низших теплокровных позвоночных. Классическим примером этого иммунитета является иммунитет домашней птицы против сибирской язвы. Давно известно, что птицы сопротивляются инокуляции сибирской язвой или проявляют лишь слабую восприимчивость; хотя более мелкие птицы по большей части восприимчивы к сибирской язве, голубь гораздо менее восприимчив, а домашняя птица представляет случай наиболее выраженного иммунитета. Считалось, что она абсолютно рефрактерна, до экспериментов Пастера и Жубера [197], которые нашли верный метод подавления этого иммунитета. Птиц, которые были инокулированы бациллой, погружали по бедра в холодную воду, чтобы снизить их температуру. Было обнаружено, что в этих условиях бацилла сибирской язвы развивалась в месте инокуляции, а позже генерализовалась в крови и неизменно вызывала смерть. Из этого был сделан вывод, что естественный иммунитет домашней птицы зависел от ее очень высокой нормальной температуры (41°–42°), которая препятствовала патогенным функциям бациллы сибирской язвы.

Гесс [198] изучил механизм этого иммунитета домашней птицы и указал на важную роль, которую фагоцитоз играет в уничтожении инокулированных бактерий.

Эти исследования были возобновлены в моей лаборатории Вагнером [199]. Установив, что бацилла сибирской язвы легко развивается в крови и сыворотке крови птиц вне организма при высоких температурах (42°–43° C), он пришел к выводу, что снижение температуры тела птиц путем погружения их в воду вызывало не усиление бациллы, а ослабление сопротивляемости животного. Он смог убедиться, что эта сопротивляемость проявляется в активности фагоцитов, которые поглощают и уничтожают бациллу сибирской язвы в ее вегетативном состоянии. У нормальной птицы фагоцитоз быстрый и очень выраженный, тогда как у птицы, которая была охлаждена, эта реакция очень слабая или отсутствует. Чтобы подтвердить этот общий вывод, Вагнер вместо снижения температуры с помощью холодной воды использовал антипирин и хлорал. Применение этого лечения также вызывало ослабление естественной защиты организма и подавляло иммунитет птицы против сибирской язвы.

[154]

Трапезников [200] тщательно изучил судьбу спор сибирской язвы при введении их птицам. Он наблюдал, что большинство из них пожирается лейкоцитами. Некоторые из спор сначала превращались в маленькие палочки, иногда вырастая в настоящие бациллы, но в конечном итоге все они становились добычей фагоцитов и погибали внутри них. Те, что находятся в вегетативном состоянии, вскоре перевариваются, споры же сохраняются некоторое время внутри фагоцитов, но в конечном итоге исчезают. Фагоцитоз у птиц, инокулированных спорами, очень выражен, и препараты, окрашенные по методу Циля, демонстрируют наиболее ясно реальность этого явления реакции. Эти препараты долгое время использовались на курсе бактериологии в Институте Пастера для демонстрации фагоцитоза.

[155]

Перед лицом этих фактов, хорошо установленных и подтвержденных много раз, невозможно принять отрицание Тилтгесом [201] поглощения этих бактерий фагоцитами птицы. Какая-то ошибка техники, которую я в данный момент не в состоянии указать точно, очевидно, вкралась в работу этого автора. Положительные данные, однако, о фагоцитозе у птицы, полученные Гессом, Вагнером и Трапезниковым, данные, подтвержденные мной самим, делают ненужными любые новые исследования с целью объяснения отрицательных результатов, полученных Тилтгесом. Что касается его экспериментов по бактерицидному действию дефибринированной крови и сыворотки крови птиц против бациллы и ее спор, экспериментов, результаты которых противоречат результатам Вагнера, противоречие может быть объяснено довольно легко, по крайней мере частично. Тилтгес несколько раз упоминает, что бациллы при посеве в сыворотку крови птицы агрегировались в комки. Тем не менее он не смог обезопасить себя от этого источника ошибки и приписал уменьшение числа колоний на чашках уничтожению, а не агглютинации бацилл. Тилтгес дает так мало подробностей об условиях, при которых проводились его эксперименты, что мы даже не знаем, при какой температуре он держал свои пробирки, содержащие кровь и сыворотку, засеянные бациллами. Поскольку Вагнер держал свои при 42°–43° C, температуре, которая соответствует температуре тела птицы, я попросил М. Жангу провести серию экспериментов по бактерицидной силе плазмы и сыворотки крови птиц на бациллу сибирской язвы, держа его пробирки при 37° C. Результат его экспериментов был в полном согласии с результатами Вагнера. В условиях, которые я только что изложил, жидкости птицы не более бактерицидны, чем они являются в условиях, поддерживаемых в экспериментах Вагнера.

Суммируя эти данные о естественном иммунитете птиц против сибирской язвы, мы, безусловно, вправе сделать вывод, что он обусловлен фагоцитозом, а не каким-либо бактерицидным свойством «гуморов».

Голубь более восприимчив, чем птица, к действию бациллы сибирской язвы, все же он проявляет определенную степень сопротивляемости против микроба. После того, что мы сказали по поводу птицы, нам нужно сделать лишь несколько замечаний о голубе, несмотря на очень оживленные дискуссии, которые имели место по механизму его иммунитета. Когда Баумгартен предлагал систематическое противодействие роли, которую играет фагоцитарная реакция в иммунитете, он поручил своему ученику Чаплевскому [202] исследовать сопротивляемость голубей против сибирской язвы. Результаты этого исследования были абсолютно отрицательными в отношении фагоцитоза. Последний, как говорили, не имеет значения в защите организма, который сопротивлялся просто потому, что бацилла не могла жить в теле голубя. Я тогда взялся изучить этот вопрос [203], и я смог продемонстрировать, что бацилла сибирской язвы вполне способна сохранять жизнь в голубе, что она может развиваться в его жидкостях, но что она неспособна защитить себя против агрессии фагоцитов, которые поглощают ее и полностью переваривают. Изолируя фагоциты, которые поглотили бациллы, введенные в тело голубя, я смог доказать, что ряд этих бацилл был все еще жив. Ослабление и смерть фагоцитов вне тела позволили бациллам сибирской язвы снова взять верх в этой борьбе, развиться и дать вирулентные культуры. Роль, которую играют фагоциты в этом примере естественного иммунитета, была таким образом поставлена вне сомнений.

[156]

Позже Чаплевский [204] сам убедился, что его предыдущие отрицательные результаты не выдержат критики, и Тилтгес в своей работе, уже упомянутой при обсуждении птицы, смог подтвердить важность фагоцитоза в защите организма голубя против сибирской язвы. Он был поражен разницей между этими двумя видами птиц. У голубя ему было легко доказать, что у особей, которые погибают от сибирской язвы, фагоцитарная реакция очень слабая, тогда как у тех, которые в конечном итоге сопротивляются бацилле, она очень выражена. Тилтгес также наблюдал, что кровь и сыворотка крови голубей при посеве in vitro с бациллой сибирской язвы проявляют лишь незначительную бактерицидную силу, факт, который далее оправдывает его в приписывании большого значения фагоцитозу в поддержании естественного иммунитета голубя. Примечательно, что в присутствии этих фактов автору не пришло в голову спросить, существует ли эта фундаментальная разница в механизме сопротивляемости, которую он считал возможной у двух птиц, столь близко родственных, как голубь и домашняя птица, действительно в природе. Я делаю вывод, что его эксперименты на птице были сделаны до тех, что на голубе, и что разница в его результатах зависела специально от того факта, что он приобрел большее мастерство в выполнении своих более поздних экспериментов.

Наблюдая, что лягушки погибают легко при инокуляции бациллой сибирской язвы, которая была адаптирована к развитию при низкой температуре, Диедонне (l.c.) попытался подавить иммунитет голубя путем использования бацилл, адаптированных к высокой температуре. Но инокуляция второго поколения бациллы сибирской язвы, культивированной при 42° C, была перенесена пятью голубями без неудобств. Даже бациллы, которые были сделаны способными, путем культивирования через шестнадцать поколений, развиваться при этой температуре, не были в состоянии убить более пяти голубей из тринадцати инокулированных. Эти попытки объяснить иммунитет как обусловленный свойствами бацилл, а не свойствами организма голубя, привели, таким образом, к результату, очень отличному от того, что ожидал Диедонне.

[157]

Голубь далее представляет интерес для нас из-за своего естественного иммунитета против бациллы туберкулеза человека. Он сопротивляется значительным дозам этой бациллы, столь вирулентной для человека и для большинства млекопитающих, и даже для некоторых птиц (канареек и попугаев). Дембинский [205], изучая механизм этого иммунитета, смог доказать, что бациллы туберкулеза человека встречают в организме голубя очень большое сопротивление со стороны фагоцитов, особенно со стороны макрофагов. Эти клетки сливаются вместе вокруг масс бацилл и заключают их внутри настоящих гигантских клеток или полинуклеарных макрофагов (рис. 21). Микрофаги в этой борьбе играют лишь второстепенную роль, но сопротивление, предлагаемое макрофагами, является наиболее эффективным. Неспособные полностью уничтожить бациллы, эти фагоциты оказывают на них неблагоприятное влияние и предотвращают их размножение и проявление их вредного действия. Важность защиты макрофагами выходит еще яснее при сравнении с тем, что происходит, если вместо бациллы туберкулеза человека мы инокулируем голубям бациллу туберкулеза птиц. В последнем случае микрофаги, конечно, быстро захватывают бациллы, но, будучи бессильными против них, они погибают, тогда как макрофаги вмешиваются только позже и в малых количествах. Результат в том, что у голубя бацилла птиц становится генерализованной в организме и вызывает смертельный туберкулез.

Рис. 21. Реакция фагоцитов голубя против бацилл туберкулеза человека.

Необходимо признать, таким образом, что иммунитет голубя против бациллы туберкулеза человека обусловлен защитой макрофагами. Этот вывод подтверждается тем фактом, что у птицы — одинаково рефрактерной против той же бациллы — также наблюдается очень сильная макрофагическая реакция.

[158]

Нокар [206], который в течение нескольких лет проводил исследования отношений между бациллами туберкулеза человека и птиц, задумал идею адаптации первой к организму птицы. С этой целью он заключил культуру бациллы туберкулеза человека в мешочек из коллодия, который он затем ввел в перитонеальную полость птиц. В этих условиях бацилла, защищенная против агрессии фагоцитов, продолжала жить внутри мешочка, через стенки которого жидкая часть перитонеальной лимфы могла диффундировать. После нескольких пассажей из мешочка в мешочек человеческая бацилла акклиматизируется к телу птицы и трансформируется в разновидность, вполне сравнимую с бациллой туберкулеза птиц. Этот эксперимент окончательно решил вопрос, столь долго обсуждавшийся, о специфической разнице между двумя туберкулезными бациллами. Он разрешил его в смысле утверждения их единства; бацилла птиц — это только модифицированная раса той же бациллы, которая вызывает туберкулез у человека и других млекопитающих.

Несмотря на большое различие между бациллой сибирской язвы и бациллой туберкулеза человека, иммунитет против этих двух бактерий, который показан у птиц, зависит в каждом случае от реакции фагоцитарной системы.

Быстро взглянув на естественный иммунитет по мере нашего восхождения по шкале животного ряда, мы теперь подходим к нему в том виде, в каком он представляется в высшем классе, млекопитающих, вопрос, на котором необходимо остановиться более подробно из-за его большой важности, а также из-за более полного изучения, которое было ему уделено.

[159]

Поскольку иммунитет беспозвоночных и низших позвоночных против бациллы сибирской язвы предоставил нам несколько важных указаний, мы сначала постараемся пролить свет на механизм сопротивляемости, предлагаемой сибирской язве некоторыми млекопитающими. Представители этого класса, однако, по большей части чрезвычайно восприимчивы к этой болезни, примеры истинного естественного иммунитета очень редки. Первое место среди резистентных млекопитающих занимает собака. Хотя молодые собаки, как продемонстрировал Штраус [207], легко заражаются смертельной сибирской язвой, собачий вид может тем не менее рассматриваться как обладающий реальным иммунитетом, так как взрослые собаки выдерживают без неудобств инокуляцию больших количеств бацилл. При введении под кожу эти бациллы вызывают местное воспаление, сопровождающееся очень выраженным диапедезом белых кровяных телец, которые сразу начинают пожирать бациллы. Этот фагоцитоз уже наблюдался Гессом [208], Мальмом [209], мной самим и рядом других исследователей, так что его существование не может быть подвергнуто сомнению. Недавно Мартель [210] продемонстрировал очень отчетливую фагоцитарную реакцию во всех тех случаях, где он имел дело с собаками, которые были рефрактерны или не очень восприимчивы. Эта реакция проявляется поглощением бактерий и большим скоплением лейкоцитов в месте инокуляции. Его исследования представляют особый интерес по причине контрольного теста, который он смог сделать на собаках, восприимчивых к сибирской язве. Несколько лет назад было продемонстрировано, что естественный иммунитет собаки против бациллы, хотя и очень реальный, тем не менее относителен и ограничен. Так, Бардах [211] установил факт, что собаки, у которых была удалена селезенка, орган, полный фагоцитов, становились восприимчивыми к сибирской язве. Даже собаки, в вены которых он вводил мелкий порошок древесного угля, взвешенный в воде, с целью «отвлечения» фагоцитоза, легко погибали от сибирской язвы.

Мартель пытался снять естественный иммунитет у собак путем введения им флоридзина или пирогалловой кислоты. Однако гораздо более постоянные результаты он получил при инокуляции бацилл бешеным собакам. Организм, ослабленный этим тяжелым заболеванием, становился очень восприимчивым к сибирской язве, и бешеное животное погибало от сибирской язвы прежде, чем бешенство успевало завершить свое развитие. При прохождении через организм бешеной собаки вирус сибирской язвы настолько усиливает свою вирулентность, что становится смертельным для нормальных собак. Мартелю также удалось усилить бациллы, выделенные от коровы, больной сибирской язвой. Во всех этих случаях, когда усиленные бациллы вызывали тяжелую и быстро приводящую к смерти инфекцию, Мартель мог продемонстрировать лишь слабую фагоцитарную реакцию.

Исследования фагоцитоза у собак, инокулированных бациллой сибирской язвы, всегда демонстрировали закономерную и постоянную связь между этой реакцией и сопротивляемостью организма. С другой стороны, эксперименты, предпринятые с целью установления роли жидкостей организма в этом иммунитете, всегда давали отрицательные результаты.

[160]

Поскольку собака из всех млекопитающих обладает наибольшим естественным иммунитетом к сибирской язве, вполне естественно, что ключ к этой загадке искали в бактерицидных свойствах ее крови. Так, Наттолл [212] на основании своих экспериментов заключает, что бацилла сибирской язвы легко разрушается дефибринированной собачьей кровью. Но поскольку этот результат не согласовывался с моими наблюдениями [213] о том, что бацилла легко культивируется в собачьей крови, и поскольку несколько исследователей, особенно Любарш [214], пришли к выводам, противоположным выводам Наттолла, были проведены систематические исследования с целью решения этой сложной проблемы. Дени и Кэзен [215] пытались устранить возражения, выдвинутые против объяснения иммунитета собаки как следствия бактерицидных свойств ее крови, утверждая, что эта способность, отсутствующая у инокулированной собаки, развивается, пока животное находится под влиянием бациллы. В этом случае иммунитет сводится, таким образом, к появлению нового свойства в жидкостях организма в ходе борьбы с инокулированной бациллой. Однако никто из исследователей, повторивших эти эксперименты, например Любарш [216] и Бейль [217], не смог подтвердить результаты бельгийских ученых. Действительно, сам Дени, возобновив это исследование совместно с Аве [218], был вынужден отвергнуть выводы своей прежней работы, выполненной в сотрудничестве с Кэзеном. Он убежден, что их ошибка была обусловлена тем, что в их экспериментах in vitro живые лейкоциты поглощали бациллы и препятствовали их развитию. В результате этих новых исследований Дени и Аве пришли к выводу, «что главная, преобладающая часть бактерицидной силы собачьей крови должна быть приписана лейкоцитам, действующим как фагоцитарные элементы» (loc. cit., стр. 15).

[161]

В результате обобщенных мною исследований мы неизбежно приходим к выводу, что естественный иммунитет собаки к сибирской язве является функцией фагоцитов. При наличии такого единообразия экспериментальных результатов становится очень важным более глубоко изучить явления, которые проявляются во время разрушения бацилл фагоцитами собаки. Какие именно фагоцитарные элементы играют главную роль в этой борьбе и какими средствами они достигают этого результата? Генгу [219] предпринял детальное исследование в моей лаборатории, чтобы ответить на эти вопросы. Он смог убедиться, в согласии с утверждениями своих предшественников, что сыворотка собачьей крови не только не является бактерицидной для бациллы сибирской язвы, но и плазма крови также не обладает этим свойством. Жидкость асептического плеврального экссудата, полученная после инъекции глютен-казеина, была также неспособна убивать бациллу сибирской язвы. Когда Генгу с помощью центрифугирования выделил лейкоциты из этих экссудатов, промыл их в физиологическом растворе, заморозил, а затем мацерировал в бульоне, он получил суспензии белых кровяных телец, к которым добавил бациллы. Он смог продемонстрировать, что когда экссудаты содержали преимущественно макрофаги, как это наблюдается в экссудатах, взятых через два или три дня, бактерицидная сила суспензий была равна нулю или была незначительной. Когда, с другой стороны, лейкоциты происходили из экссудатов, возраст которых составлял всего двадцать четыре часа, и состояли почти исключительно из микрофагов, разрушительное действие экстракта микрофагов на бациллы в бульоне было наиболее выраженным. Теперь полностью доказано, что в экссудате, вызванном у рефрактерной собаки инъекцией бацилл сибирской язвы, именно микрофаги проявляют фагоцитарную реакцию против этой бациллы.

Таково положение вопроса об иммунитете собаки к сибирской язве в настоящее время. Естественный иммунитет этого вида, который, хотя и не является безграничным, весьма реален, зависит от активности фагоцитов. Эти элементы под воздействием бациллы и продуктов ее жизнедеятельности проявляют положительный хемотаксис самого выраженного характера; они приближаются к бациллам, поглощают их путем физиологического акта и разрушают с помощью вещества, которое не обнаруживается ни в плазме, ни в сыворотке крови, но которое можно продемонстрировать в экстракте микрофагов.

[162]

Несмотря на единообразие и точность этих данных, невозможно ограничиться описанием одного лишь случая собаки как примера естественного иммунитета к сибирской язве. Если бы сопротивляемость крысы к этому заболеванию представляла лишь исторический интерес из-за большого количества работ, посвященных этому вопросу, мы могли бы отнести ее к главе, отведенной истории наших знаний об иммунитете. Но это не так. Сибирская язва у крыс — это предмет, полный очень ценных указаний, и фон Беринг был совершенно прав, говоря, что всякий, кто желает получить истинное представление о естественном иммунитете к вирусу, должен уделить особое внимание этому примеру.

На самом деле можно утверждать, что серая крыса (Mus decumanus), черная крыса (Mus rattus) и белые крысы далеки от обладания истинным иммунитетом к сибирской язве. Тем не менее они проявляют более или менее выраженную устойчивость к этому заболеванию и всегда менее восприимчивы, чем другие лабораторные грызуны: мыши, морские свинки и кролики. Крысы сопротивляются ослабленным бациллам (вакцинам против сибирской язвы) лучше, чем эти три вида, и для того, чтобы вызвать у них смертельную сибирскую язву, необходимо инокулировать гораздо большее количество вирулентных бацилл. С другой стороны, крысы отличаются большой нерегулярностью в сопротивлении, которое они оказывают бацилле. Порой они сопротивляются очень вирулентным бациллам; в других случаях они заболевают смертельной болезнью после инъекции очень ослабленных бацилл (первая вакцина Пастера).

[163]

В моем первом мемуаре о сибирской язве [220] я отметил тот факт, что у крыс фагоцитоз против бациллы при подкожной инъекции был более выраженным, чем после такой же инокуляции кролику и морской свинке. Позже этот факт был оспорен несколькими исследователями, которые отказались признать масштаб и важность фагоцитарной реакции у крысы. Это противодействие было усилено очень интересным открытием, сделанным фон Берингом [221], а именно тем, что сыворотка крови крысы обладает удивительно разрушительной силой для бациллы сибирской язвы. Когда этот исследователь добавлял определенное количество бацилл сибирской язвы к некоторому количеству сыворотки крови крысы, они вместо того, чтобы удлиняться в нити и делиться, претерпевали изменения, теряли свое нормальное преломление и очень плохо окрашивались реактивами. От бацилл, подвергшихся такой обработке, оставались только оболочки. Фон Беринг считал, что это бактерицидное действие сыворотки зависит от присутствия органического основания, растворенного в жидкости крови. Ему достаточно было нейтрализовать сыворотку с помощью кислоты, и тотчас же происходило очень обильное развитие бациллы. На основании этих исследований фон Беринг пришел к выводу, что естественный иммунитет крысы к сибирской язве можно свести к химическому действию крови на бациллу.

В одной из своих самых последних публикаций этот автор [222] возвращается к вопросу о сибирской язве у крыс и резюмирует свою нынешнюю точку зрения следующим образом. Он рассматривает иммунитет этих грызунов как относительный, а не абсолютный. «Бациллы сибирской язвы, — говорит он, — погибают в сыворотке крысы in vitro; и в тех случаях, когда инокуляция этих животных вирусом сибирской язвы не является смертельной, по крайней мере разумно предположить, что жидкость крови также обеспечивает эту защиту в организме живой крысы. Теперь иммунитет, который проявляется без помощи какой-либо активности клетки, должен, несомненно, рассматриваться как имеющий гуморальный характер» (loc. cit., стр. 202).

[164]

Начнем с анализа фактов, представленных у крыс, в подкожную клетчатку которых мы ввели вирус сибирской язвы. Некоторое их число сопротивляется, не проявляя никаких поражений, кроме некоторого экссудативного воспаления в месте инокуляции. Экссудат в этом случае очень богат лейкоцитами, которые быстро выполняют свою фагоцитарную функцию и разрушают поглощенные бациллы. В этой реакции главную роль играют микрофаги, макрофаги же вмешиваются позже и в гораздо менее выраженной форме. Однако обычно инокулированные крысы проявляют более серьезное заболевание: бациллы размножаются в месте инокуляции и вызывают образование обширного отека, богатого серозной жидкостью, прозрачного и очень бедного лейкоцитами. Только позже эти клетки вмешиваются в значительном количестве. Экссудат становится более густым и мутным, многочисленные белые кровяные тельца пожирают бациллы и вызывают их исчезновение. Под влиянием этой выраженной реакции животные в большинстве случаев выздоравливают, как это уже было установлено Франком [223]. Но даже у тех особей, которые погибают от сибирской язвы, смерть наступает более или менее поздно, и исследование внутренних органов при этом выявляет значительную фагоцитарную реакцию. Селезенка, часто огромных размеров, содержит многочисленные макрофаги, которые заполнены нормальными или более или менее измененными бациллами. В печени также обнаруживаются эти макрофаги, которые поглотили несколько микрофагов и некоторые бактерии (рис. 22 и 23).

Когда вместо бактерий в состоянии палочек подкожно или в переднюю камеру глаза инокулируются споры сибирской язвы, мы можем наблюдать их прорастание. Развивается целое поколение бацилл, которые ведут себя подобно тем, что мы уже описали, то есть они вызывают экссудацию и в конечном итоге перевариваются внутри фагоцитов (рис. 24 и 25). Все эти явления фагоцитоза я подробно описал более десяти лет назад в своем мемуаре о сибирской язве у крыс [224]. С тех пор не было приведено ни одного факта, который опроверг бы изложенные там результаты.

Рис. 22. Макрофаг из печени крысы, больной сибирской язвой.

Рис. 23. Макрофаг, содержащий бациллы, из печени крысы, больной сибирской язвой.

Рис. 24. Микрофаг крысы, заполненный бациллами.

Рис. 25. Два микрофага крысы, поглотившие бациллы.

[165]

Как объяснить этот парадоксальный факт, что сибирская язва, которая растет в теле крысы, вызывая там заболевание более или менее тяжелое, а иногда и смертельное, так легко разрушается сывороткой и кровью, когда они извлечены из организма? Из многочисленных экспериментов, проведенных Хэнкином [225], а также Ру и мною [226], было доказано, что бактерицидную силу жидкостей крысы нельзя призывать в качестве причины сопротивляемости животного к сибирской язве. Те крысы, которые оказываются очень восприимчивыми к этому заболеванию и умирают от сибиреязвенной инфекции, тем не менее дают сыворотку, которая предотвращает сибирскую язву у других крыс и которая защищает даже мышей, которым были введены бациллы. Крысы, которым мы инокулируем с одной стороны тела немного культуры сибирской язвы, а с другой стороны такое же количество бацилл, смешанных с сывороткой крови того же животного, проявляют отек только в первом месте. Именно из этой последней точки происходит общая инфекция, в то время как сторона, куда были введены бациллы сибирской язвы, смешанные с сывороткой, остается незатронутой. Савченко [227], который исследовал иммунитет крысы в моей лаборатории, к только что упомянутым фактам добавил наблюдение, что когда инъекция бацилл вызывает кровоизлияние, крыса выживает. Когда, напротив, инъекция делается тонкой иглой и без излияния крови, крыса заболевает смертельной сибирской язвой.

[166]

[167]

Из этих фактов следует, что кровь, как только она выходит из сосудов, претерпевает изменение в своем составе и становится бактерицидной для бациллы сибирской язвы, тогда как, циркулируя в организме, она не проявляет такой силы. Савченко изучил вещество в сыворотке, которое убивает бациллы, и продемонстрировал, что оно выдерживает нагревание до 56° C; даже при нагревании до 61° C сыворотка все еще проявляет определенную бактерицидную силу для очень ослабленных бацилл (первая вакцина Пастера). Исследования распределения этой бактерицидной силы в живой крысе убедили Савченко, что она не переходит в жидкость пассивного отека, вызванного замедлением кровообращения, ни в жидкость активного отека, развившегося в результате инокуляции бацилл сибирской язвы. Он наблюдал, что даже бацилла первой вакцины Пастера обильно растет в отечной жидкости, образовавшейся при инъекции вирулентных бацилл. Перитонеальная лимфа, однако, оказывает очень выраженное бактерицидное действие на бациллы. Продемонстрировав этот факт, Савченко задал себе вопрос: не может ли большая разница между действием этих жидкостей зависеть от того, что лимфа богата лейкоцитами, тогда как в жидкости отека они почти отсутствуют? Преследуя этот вопрос, Савченко провел сравнительное изучение бактерицидной силы сыворотки, приготовленной вне тела, и плазмы крови, полученной с помощью экстракта голов пиявок, и пришел к выводу из своих исследований, что бактерицидное вещество циркулирует в плазме живой крысы и что оно не происходит из микрофагов, а должно рассматриваться скорее как секрет макрофагов в крови и эндотелиальных клеток. Этот результат не был подтвержден Генгу [228], который также занялся изучением этого важного вопроса в моей лаборатории. Вместо приготовления плазмы с помощью добавления экстракта пиявок он воспользовался методом гораздо более совершенным и свободным от источников ошибок. Он не вводил никакого чужеродного вещества, способного повлиять на результаты его экспериментов. Собирая кровь крысы в парафинированные пробирки и центрифугируя ее в аналогичных пробирках, он получил жидкость, которая гораздо ближе подходит к плазме циркулирующей крови, чем сыворотка. Эта жидкость, однако, свертывается по прошествии довольно длительного интервала, что доказывает, что ее нельзя рассматривать как плазму крови. Генгу исследовал бактерицидную силу жидкой части «плазмы», полученной описанным процессом, на бациллу сибирской язвы, а также силу сыворотки, приготовленной в пробирках обычным способом. Разница между двумя жидкостями очень заметна; в то время как сыворотка очень быстро разрушает посеянные в ней бациллы и растворяет их содержимое, жидкость «плазмы» не имеет подобного действия. Эти результаты, подтвержденные несколько раз, очень определенно демонстрируют, что плазма циркулирующей крови не содержит никакого бактерицидного вещества. Оно во время жизни животного находится внутри лейкоцитов и только выходит из них, когда клетки лопаются или претерпевают глубокие поражения, что происходит, когда образуется сгусток и когда сыворотка готовится вне организма, или в излившейся и свернувшейся крови, или, опять же, в перитонеальной лимфе во время фаголиза. Этот фаголиз неизбежно вызывается в результате быстрой инъекции чужеродных жидкостей в брюшную полость, например бульона или физиологического раствора, содержащих бактерии в суспензии.

[168]

Факты, которые мы собрали по поводу сибирской язвы у крыс, образуют целое, части которого находятся в полной гармонии. Фагоциты этого вида грызунов содержат бактерицидный фермент, своего рода цитазу, которая сопротивляется температурам, приближающимся к 60° C. Эта цитаза очень активна против бацилл, но в живом животном она может действовать только внутри фагоцитов или, в преходящей и неполной форме, вне этих клеток, когда в брюшной полости происходит фаголиз. Сопротивляемость, оказываемая крысой сибирской язве, зависит, таким образом, от этой фагоцитарной активности. Для ее проявления необходимо, прежде всего, чтобы фагоциты проявили положительный хемотаксис к бациллам, а затем чтобы они захватили и поглотили эти организмы. Это жизненные акты, которые решают результат борьбы. Когда фагоциты оказываются неактивными, бациллы размножаются в отечной жидкости, которая не содержит бактерицидной цитазы, и переходят в плазму лимфы и крови, которые также неспособны убить эти бактерии. Животное может, таким образом, умереть от сибирской язвы, несмотря на присутствие в его теле большого количества бактерицидной цитазы, которая находится в местах, куда бациллы не проникли. В тех случаях, с другой стороны, где фагоциты выполняют свою функцию, где они устремляются к угрожаемой точке и пожирают инокулированные бактерии, эти бациллы приходят в контакт с внутриклеточной цитазой и подвергаются полному перевариванию. Организм в этом случае избавляется от своих врагов и победоносно сопротивляется инфекции.

[169]

Сибирская язва у крыс, таким образом, представляет собой один из самых поучительных примеров естественного иммунитета. Но детальный анализ механизма этой сопротивляемости очень ясно демонстрирует большую роль, которую играют фагоциты в этом процессе. В этом отношении организм крысы представляет, в общем виде, большую аналогию с естественным иммунитетом собаки, птиц и других представителей животного мира, которых мы исследовали. В этих условиях бесполезно настаивать на других примерах сопротивляемости сибирской язве, которые, более того, относятся гораздо чаще к естественному иммунитету против ослабленных бацилл, чем к иммунитету против истинного вируса сибирской язвы. Кролики и морские свинки, столь чувствительные к этому вирусу, часто сопротивляются инокуляции вакцин Пастера. Кролик, в общем, рефрактерен к первой вакцине против сибирской язвы; он может даже сопротивляться второй вакцине. Морская свинка, более чувствительное животное, не проявляет никакого естественного иммунитета, кроме как к первой вакцине. Во всех этих случаях механизм сходен с тем, который крыса и собака противопоставляют вирулентной сибирской язве. Бациллы, в какую бы часть тела они ни были введены, вызывают экссудативное воспаление, которое приводит большое количество лейкоцитов к угрожаемой точке. Эти клетки легко выполняют свою фагоцитарную функцию и избавляют организм от введенных бактерий. Чтобы получить полное представление о роли, которую играет эта реакция, полезно ввести под кожу одного уха кролика немного вакцины против сибирской язвы, а под кожу другого — такое же количество вирулентных бацилл. Разница между реакцией в двух случаях очень поразительна. Ухо, инокулированное вакциной, вскоре становится местом ограниченного воспаления с гнойным экссудатом, все бациллы в котором были поглощены лейкоцитами. Другое ухо, напротив, представляет вокруг введенного вируса только серозный или окрашенный кровью экссудат, не содержащий лейкоцитов или содержащий их в малом количестве; бациллы находятся свободно в жидкости и размножаются без всяких препятствий. Не встречая никакого сопротивления, вирус становится генерализованным по всему организму и приводит к смерти от сибиреязвенной септицемии. Кролики, которым вводятся только вакцины против сибирской язвы, противопоставляют вторжению бацилл лейкоцитарный барьер, который останавливает их распространение. Естественный иммунитет овцы, кролика и морской свинки также является фагоцитарным иммунитетом, но он способен проявляться только против бацилл, предварительно ослабленных в своей вирулентности. Исследования г-жи Мечниковой [229] о реакции фагоцитов этих животных на бациллы двух вакцин Пастера против сибирской язвы продемонстрировали важность разрушения этих бацилл лейкоцитами. Все другие примеры естественного иммунитета к сибирской язве также являются лишь относительными. Птица, которая сопротивляется вирусу сибирской язвы, достаточно сильному, чтобы убить вола или лошадь, погибает от особой разновидности сибирской язвы, культивированной Левиным [230]. Собака, как мы видели, несмотря на свой выраженный естественный иммунитет к сибирской язве, убивается особой бациллой сибирской язвы, приготовленной Мартелем.

В этом иммунитете к сибирской язве мы имеем дело с бациллой, способной жить и воспроизводить себя в чрезвычайно разнообразных средах. Отсюда причина, можно сказать, того, что бактерицидное влияние жидкостей в этом случае так мало выражено. Чтобы выявить его, мы должны, следовательно, выбрать бактерию, менее способную адаптироваться к химическому составу различных питательных сред. В этом деле мы не можем сделать ничего лучше, как выбрать патогенные спириллы чрезвычайно нежной природы и проанализировать механизм естественного иммунитета некоторых видов животных по отношению к ним. Не следует забывать, однако, что здесь мы используем представителей бесконечно малого меньшинства патогенных бактерий, большинство которых напоминает бациллу сибирской язвы по легкости, с которой они могут культивироваться во всех видах питательных сред.

[170]

[171]

Рис. 26. — Лейкоцит морской свинки в процессе поглощения двух спирилл.

Рис. 27. — Тот же лейкоцит, полчаса спустя.

Рис. 28. — Тот же лейкоцит, через десять минут после рис. 27.

Рис. 29. — Лейкоцит морской свинки в процессе поглощения очень активной спириллы.

Рис. 30. — Тот же лейкоцит, сорок минут спустя.

Рис. 31. — Тот же лейкоцит, через полчаса после рис. 30.

Спирилла возвратного тифа человека (Spirochaete obermeyeri) была первым патогенным микробом, найденным при инфекционном заболевании, отчетливо человеческом. Открытая треть века назад, она прошла через руки самых искусных бактериологов, которые пробовали все возможные методы культивирования ее вне тела. Кох сам пытался решить эту проблему, но, несмотря на свое несравненное мастерство, не преуспел. Позже Сахаров [231] в Тифлисе открыл спириллу, очень похожую по внешнему виду, которая вызывала смертельную септицемию у гуся. Он также пытался культивировать ее, но тщетно. Его преемники не были более удачливы в этом отношении. Вот, значит, два микроорганизма, против которых естественный иммунитет должен быть легко достижим и в манере, совершенно отличной от таковой против сибирской язвы. Ничто, действительно, не является более частым, чем примеры очень стабильного естественного иммунитета против спирилл Обермейера и Сахарова. Поскольку я хотел получить ясное представление о механизме, с помощью которого морская свинка сопротивляется инъекциям спириллы гусиной септицемии (Spirochaete anserina), я делал инъекции крови гуся, содержащей количество этих организмов, в брюшную полость морских свинок. Эта инъекция, как обычно, вызывает исчезновение большинства лейкоцитов в результате очень выраженного фаголиза. Мы знаем, что в этих условиях поврежденные лейкоциты позволяют некоторому количеству бактерицидной цитазы выйти наружу. Несмотря на это, спириллы остаются неповрежденными и проявляют очень активные движения в перитонеальном экссудате. Этот экссудат после периода фаголиза, который длится два или три часа, начинает снова наполняться лейкоцитами, которые подходят во все возрастающем количестве, факт, который не мешает спириллам передвигаться с большой быстротой. Даже через семь часов после инъекции крови гуся мы все еще находим много чрезвычайно активных спирилл среди большого количества недавно мигрировавших лейкоцитов, некоторые из которых даже на этой стадии содержат красные кровяные тельца крови гуся. Только позже начинается поглощение этих спирилл лейкоцитами, лейкоциты в конце концов повреждают и полностью разрушают их. Этот акт фагоцитоза может быть легко наблюдаем в висячих каплях перитонеального экссудата инокулированных морских свинок. Внимание наблюдателя привлекают некоторые лейкоциты-макрофаги, которые выбрасывают один или два конических отростка (рис. 26–28). Эти псевдоподии прикрепляются к спириллам, которые проявляют очень бурные движения, как будто желая высвободиться из захвата лейкоцита. Иногда спирилла преуспевает в побеге, но обычно она становится окруженной протоплазмой и погружается все глубже и глубже в вещество лейкоцита. Даже когда она почти окружена, свободная часть спириллы все еще продолжает двигаться (рис. 29–31). Эти движения прекращаются только после полного поглощения спириллы. Оказавшись внутри фагоцита, спирилла переваривается и вскоре становится неузнаваемой.

Рис. 32. — Макрофаг морской свинки, заполненный спириллами возвратного тифа (по Савченко).

Рис. 33. — Макрофаг морской свинки, содержащий три Spirochaete obermeyeri (по Савченко).