«Токсичность кофеина: экспериментальное исследование на различных видах животных»

1 февраля: инъекция началась в 15:00, введено 10 см³ за 12 минут; с 15:01 до 15:09 введено 3 см³, судороги; с 15:09 до 15:14 введено 3 см³, за которыми последовали сильные судороги, выраженный опистотонус; 16:30, кролик умер; общее количество введенного раствора — 16 см³.

Rabbit 561. Gray female. Weight, 1,450 grams. Diet, oats.

1 февраля: инъекция началась в 11:40; 11:48, кролик боролся, введено 7 см³ 2-процентного кофеина; 11:50, судороги, всего введено 10 см³ 2-процентного кофеина; 11:55, инъекции остановлены; инъекции возобновлены в 11:58, сильные судороги, инъекции прекращены, общее количество полученного раствора — 14,5 см³ 2-процентного кофеина; 13:30, найден мертвым, не мочился, в мочевом пузыре обнаружено 25 см³ мочи.

Rabbit 560. Gray male. Weight, 1,620 grams. Diet, oats.

1 февраля: инъекция началась в 11:00; 11:10, введено 7 см³ 2-процентного кофеина, кролик боролся; в течение следующих трех минут был введен 1 см³, кролик боролся, но судорог не было, инъекция остановлена; возобновлена в 11:15 и продолжалась 10 минут, за это время введено 8 см³ 2-процентного кофеина; общее количество введенного кофеина — 16 см³; рефлексы заметно усилены; 12:00, тетанические судороги время от времени до 14:00, затем оставался растянутым на животе, конечности вытянуты.

2 февраля: 9:00, найден мертвым.

Rabbit 559. Gray female. Weight, 1,875 grams. Diet, oats.

31 января: 16:00, судороги после инъекции 9 см³ 2-процентного кофеина за 14 минут; 16:08, судороги после инъекции 7 см³ кофеина за 8 минут; с 16:10 до 16:12 введено еще 2 см³, кролик лежит растянувшись на животе, конечности вытянуты; общее количество введенного кофеина — 18 см³ (190 мг на килограмм).

1 февраля: 14:00, состояние хорошее, ходил, аппетит хороший, выделил 155 см³ темной, красновато-коричневой мочи с 17:30 предыдущего дня.

Rabbit 279. Gray and white female. Weight, 1,320 grams.

24 февраля: 10:09, 6 см³ 2-процентного кофеина быстро введены в яремную вену; 10:15, непроизвольное подергивание мышц ног, но других симптомов нет; с 10:23 до 10:26 введено 3 см³ 2-процентного кофеина; с 10:27 до 10:28 введено 2 см³ 2-процентного кофеина, судороги; 10:29, судороги прекратились; 10:32, судороги; 11:00, кролик лежит на боку, передние конечности парализованы, задние конечности сокращены, клонических судорог нет, дышал глубже и медленнее, чем обычно; 11:10, кролик умер, судорог непосредственно перед смертью не было; количество введенного кофеина — 11 см³ 2-процентного раствора, или 0,166 грамма на килограмм.

Rabbit 254. Belgian hare, female. Weight, 1,285 grams. Diet, oats.

12 ноября: с 13:30 1/3 до 14:47 3/4 в ушную вену введено 10,8 см³ 2-процентного кофеина из бюретки, после инъекции 6,2 см³ — одышка, 6,7 см³ — борьба, судороги; в 13:50 1/2 освобожден от держателя, паралич особенно выражен в передних конечностях; 13:50, оправился, выжил; общее количество введенного раствора — 10,8 см³ 2-процентного кофеина за 17 минут 25 секунд, или 0,16 грамма кофеина на килограмм.

Rabbit 255. Belgian hare, male. Weight, 1,105 grams. Diet, oats.

12 ноября: с 14:31 3/4 до 14:35 1/4 получено 3,7 см³; с 14:37 1/6 до 14:46 1/6 введено 5 см³; после инъекции 6,1 см³ — судороги, сопровождающиеся одышкой, затем непрерывная борьба; когда было введено 8,3 см³, у кролика случился еще один приступ судорог; 14:47, тоническое сокращение передних конечностей; введено 8,7 см³ (158 мг на килограмм) за 15 минут 35 секунд.

Кролик 567. Серая самка. Диета: овес.

6 февраля: инъекция началась в 16:11; 16:18, судороги после инъекции 5 см³ 2-процентного кофеина; 16:21, судорога после общего введения 8 см³; 16:24, инъекция возобновлена и введено еще 2 см³; 16:28, судороги, введено еще 2 см³; всего введено кофеина 12 см³, или 162 мг на килограмм; 16:40, у кролика парализованы задние конечности; 17:00, найден мертвым.

В восьми экспериментах, составляющих серию B, кролики № 567, 254, 279 и 255, которые можно обозначить как Группу II, получили дозы 162, 160, 166 и 158 мг соответственно. № 562, 561, 560 и 559, которые можно обозначить как Группу I, получили около 200 мг кофеина на килограмм. В Группе II, получившей меньшие дозы, один (№ 254) выжил. Это можно считать исключением, поскольку, как было показано в экспериментах предыдущей серии, даже меньшие дозы могут быть смертельными. Таким образом, около 160 мг на килограмм является наименьшей безусловно смертельной дозой. Это можно было бы рассматривать как противоречие результатам, полученным для кролика № 559, но будет замечено, что в этом случае диурез был очень выраженным. Результаты экспериментов № 294 и 255 интересны в этой связи, поскольку они указывают на то, что умеренная разница в скорости инъекции не оказывает никакого влияния на токсичность кофеина. Большая устойчивость к кофеину кролика № 559, по всей вероятности, связана, следовательно, с усиленным диурезом.

Серия C.

В этих экспериментах была определена минимальная токсическая доза. Условия были такими же, как в экспериментах других серий.

Rabbit 293. Belgian hare, female. Weight, 1,610 grams. Diet, oats.

18 февраля: с 15:40 до 15:43 в ушную вену введено 4 см³ 2-процентного теплого раствора кофеина, судороги при введении 3 см³, повторные приступы; 16:00, поднялся на ноги, но сразу упал и лежал растянувшись на животе.

19 февраля: 9:00, кролик выглядел нормально, по-видимому, оправился.

Rabbit 227. White male. Weight, 2,320 grams.

26 октября: с 15:29 1/4 до 15:37 1/2 в ухо из бюретки введено 6,7 см³ 2-процентного кофеина, симптомов нет; эксперимент прекращен; выжил.

Rabbit 563. Gray female. Weight, 1,650 grams. Diet, oats.

6 февраля: инъекция началась в 13:02, введено 3,5 см³ 2-процентного кофеина (42 мг на килограмм) за четыре минуты, еще 0,6 см³ в течение следующих двух с половиной минут, общее количество введенного раствора 4,1 см³; 13:10, повышенная чувствительность, некоторое нарушение мышечной координации; беспокойство; 13:35, рефлексы снижены, мочился и ходил, походка нормальная. Под наблюдением в течение нескольких дней; симптомов не отмечено.

Rabbit 564. Gray female. Weight, 1,515 grams.

6 февраля: инъекция началась в 13:26, введено 3,5 см³ 2-процентного кофеина (46 мг на килограмм) со скоростью 1 см³ в минуту; 13:30, рефлексы усилены; 13:34, выраженный парез конечностей, кролик растянулся на животе, ноги отведены и частично вытянуты, может прыгать, но походка нарушена, нежелательных симптомов не замечено, под наблюдением в течение нескольких дней после эксперимента.

Rabbit 565. Gray female. Weight, 1,545 grams. Diet, oats.

6 февраля: начал вводить в 15:40, получил 2,5 см³ 2-процентного кофеина внутривенно за две минуты, или 32 мг на килограмм, под наблюдением весь день, симптомов нет.

Rabbit 566. Gray female. Weight, 1,900 grams. Diet oats.

6 февраля: инъекция началась в 15:05, получил 3 см³ 2-процентного кофеина внутривенно за три минуты, или 31 мг на килограмм, симптомов не наблюдалось.

Эти эксперименты показывают, что доза около 50 мг на килограмм при внутривенном введении вызывает легкие симптомы, такие как усиление рефлексов. В четырех экспериментах с таким количеством кофеина эти эффекты наблюдались в каждом случае. В экспериментах, где внутривенно вводились меньшие количества (30 мг на килограмм), проявления симптомов не было. Таким образом, дозу не более 50 мг на килограмм можно считать минимальной токсической дозой при внутривенном введении в указанных условиях.

Серия D.

В этих экспериментах использовался 0,5-процентный раствор кофеина, чтобы проверить влияние концентрации на его токсичность; скорость инъекции составляла 1 см³ в минуту.

Rabbit 569. Gray male. Weight, 1,475 grams. Diet, oats.

6 февраля: с 11:50 до 12:01 введено 10 см³ 0,5-процентного кофеина; с 12:03 до 12:12 введено 10 см³ 0,5-процентного кофеина; с 12:13 до 12:26 введено 10 см³ 0,5-процентного кофеина, общее количество введенного раствора — 30 см³; 12:20, выделил 35 см³ мочи; 12:30, усиление рефлексов, но судорог нет; 16:00, рефлексы усилены.

11 февраля: жив, состояние хорошее.

Rabbit 574. Gray female. Weight, 1,555 grams. Diet, oats.

8 февраля: с 10:25 до 10:33 введено 4 см³ 0,5-процентного кофеина в солевом растворе, инъекция прекращена на пять минут; с 10:38 до 11:10 введено 30 см³, общее количество полученного раствора кофеина — 34 см³; 11:55, очень чувствителен; рефлексы заметно усилены.

9 февраля: жив, состояние хорошее.

Rabbit 571. Gray female. Weight, 1,530 grams. Diet, oats.

7 февраля: инъекция с 15:18 до 15:50, получил 30 см³ за 32 минуты, не гиперчувствителен; 15:55, беспокойство и слабость конечностей; 16:10, контроль передних конечностей нарушен, отчетливо паретичен, но пытался ходить, умер в тот же день.

Rabbit 568. Gray male. Weight, 1,605 grams. Diet, oats.

7 февраля: инъекция с 10:53 до 11:01, введено 10 см³ 0,5-процентного кофеина; 11:03, инъекция возобновлена после двухминутного интервала; 11:14, получил 10 см³ 0,5-процентного кофеина внутривенно за 11 минут; 11:16, инъекция возобновлена; 11:35, получил 12 см³ 0,5-процентного кофеина, общее количество полученного раствора кофеина — 32 см³; 12:30, выделил 14 см³ кровавой мочи; 12:55, судороги и смерть через несколько минут. Вскрытие показало застой крови во внутренних органах, но других поражений не было.

Rabbit 570. Gray female. Weight, 1,225 grams. Diet, oats.

7 февраля: с 14:06 до 14:35 введено 24,5 см³ 0,5-процентного кофеина, рефлексы усилены, но судорог нет, парез особенно выражен в передних конечностях; 15:00, выделил мочу, нормальную по внешнему виду, рефлексы не усилены, но кролик был слаб.

9 февраля: найден мертвым. Вскрытие: печень, селезенка и почки полнокровны; толстый кишечник геморрагичен; сальник полнокровен и показал наличие мелких казеозных узелков; печень показала спайку с диафрагмой; внутренние органы имели вид внутрибрюшной инфекции.

Из пяти кроликов этой серии трое умерли в результате введения кофеина. Остальные двое, которые выжили, проявили лишь легкие симптомы, такие как усиление рефлексов, но никаких признаков тяжелого отравления, подобных тем, что наблюдались после инъекции таких же доз кофеина в серии A, когда вводился 2-процентный раствор кофеина. Судороги были замечены только в одном случае (№ 568); парез — в двух случаях (№ 570 и 571). Нервные симптомы даже в этой группе, следовательно, были гораздо мягче, чем в серии A. Процент смертности, однако, был выше, чем в серии A, в которой концентрация кофеина была в четыре раза выше. Вполне вероятно, что нагрузка на сердце из-за внезапного увеличения объема крови и ее разбавления может быть важным фактором в увеличении токсичности кофеина. Вполне возможно, что дозы, как раз достаточно большие, чтобы угнетать нормальное сердце, могут вызвать паралич уже перенапряженного органа.

Серия E.

В двух экспериментах этой серии была протестирована скорость инъекции как возможный фактор, влияющий на токсичность кофеина. 2-процентный раствор кофеина вводился со скоростью 1 см³ за две с половиной — три минуты.

Rabbit 572. Gray male. Weight, 1,770 grams. Diet, oats.

8 февраля: инъекция началась в 15:00, прекращена в 15:37 и возобновлена в 15:38; кролик был беспокоен; инъекция закончена в 15:52. Общее количество полученного раствора — 17,4 см³ 2-процентного кофеина внутривенно за 52 минуты; периодически боролся во время инъекции; передние ноги парализованы.

9 февраля: найден мертвым.

Rabbit 573. Gray male. Weight, 1,810 grams. Diet, oats.

8 февраля: начал вводить в 13:35 и прекратил в 14:27; получил 18 см³ 2-процентного кофеина внутривенно за 52 минуты; рефлексы заметно усилены вскоре после этого; 14:45, выделил кровавую мочу; 16:30, рефлексы усилены; других симптомов нет.

9 февраля: 9:00, найден мертвым.

Будет замечено, что некоторая задержка в появлении симптомов была вызвана более медленной инъекцией, но конечный результат был таким же, как при более быстрой инъекции. Вполне вероятно, следовательно, что гораздо более медленная скорость инъекции может значительно снизить токсичность кофеина.

Из результатов экспериментов по внутривенной инъекции, суммированных в таблице, следует, что минимальная токсическая доза для кроликов 2-процентного раствора кофеина, введенного со скоростью 1 см³ в минуту, составляет около 50 мг на килограмм. Двойная доза вызывает тяжелые симптомы и может быть смертельной; 160 мг на килограмм — безусловно смертельны. Если скорость инъекции уменьшается, токсичность кофеина снижается, но этот эффект не выражен, если инъекции не очень медленные. Разбавление раствора кофеина в некоторой степени подавляет нервные симптомы, но токсичность, напротив, по-видимому, увеличивается.

Таблица 5. Внутривенные инъекции.

SERIES A. No. Weight.Caffein per kiloSymptoms.Duration of life. Diet. Remarks. Grams. Mg. 194 1,310 114PresentSurvivedOatsWhite female. 556 1,635 13410 minutes20 minutes do.Gray female. 557 1,580 114PresentSurvived do. Do. 558 1,590 100 do. do. do. Do. 292 1,770 141 do. do. do. Do. 194 1,350 126 do.10 minutesCarrots Do. SERIES B, GROUP I. 562 1,650 2001½ hoursOatsGray female. 561 1,450 200 do. do. Do. 560 1,620 200PresentLess than 24 hours do. Do. 559 1,875 190 do.Survived do. Do. SERIES B, GROUP II. 279 1,320 1661 hourGray and white female. 254 1,285 160SurvivedOatsGray female. 567 162About 45 minutes Do. 255 158Died SERIES C. 293 1,610 500PresentSurvivedOatsGray female. 227 2,320 570None do.White male. 563 1,650 500Present do. do.Gray female. 564 1,515 460 do. do. Do. 565 1,545 320None do. do. Do. 566 1,900 310 do. do. do. Do. SERIES D. 569 1,475 100PresentSurvivedOatsGray male. 574 1,555 112 do.do. do. Gray female. 571 1,530 100 do.About 2 hours do. Do. 568 1,605 10020 minutes do.Gray male. 570 1,225 100Less than 20 hours do. Do. SERIES E. 572 1,770 200PresentAbout 24 hoursOats 573 1,810 200 do. do.

РЕЗЮМЕ.

Результаты экспериментов на кроликах демонстрируют значительную вариативность токсичности однократной дозы. Индивидуальные различия в устойчивости к данному препарату были настолько велики, что одни и те же эксперименты приходилось повторять многократно для каждого способа введения, прежде чем можно было сделать удовлетворительные выводы. Это наглядно иллюстрируется экспериментами с внутривенной инъекцией, при которых доза почти 0,2 грамма на килограмм не была летальной. Аналогичные случаи исключительной устойчивости или чувствительности к кофеину наблюдались и при других способах его введения. Сравнение токсичности кофеина при различных методах введения в данном исследовании показывает четко выраженные различия в его активности, хотя они не столь значительны, как в аналогичных экспериментах с другими алкалоидами, описанных рядом исследователей. Токсичность кофеина в этих экспериментах на кроликах указывает на то, что она максимальна при внутривенном введении и минимальна при введении через рот. Отношение минимальных токсических доз при этих двух способах введения кофеина составляло около 7,1; отношение минимальных летальных доз составляло около 3,1. Токсичность при подкожном введении примерно на 15–20 процентов выше, чем при введении через рот. Разница между внутримышечной и подкожной инъекцией еще более заметна. Токсичность кофеина при введении в мышцы занимает промежуточное положение между токсичностью при подкожном и внутрибрюшинном введении и составляет примерно половину от токсичности при внутривенной инъекции. Мельцер и Ауэр (58), экспериментировавшие с рядом препаратов, обнаружили, что внутримышечный метод введения столь же эффективен, как и внутривенный, причем флуоресцеин, согласно их наблюдениям, является единственным исключением. В экспериментах Соллмана и Брауна (81) с спорыньей эффект был совершенно иным, чем полученный Мельцером и Ауэром (58) с использованными ими препаратами. Вполне возможно, что результат, полученный со спорыньей, лишь иллюстрирует различие в поведении различных веществ в этом отношении. Это представляется вероятным из-за разницы в скорости всасывания различных веществ. Так, согласно Ашару, Гайяру и Рибо (Compt. rend. Soc. biol., 1907, 62: 90), всасывание из брюшной полости варьируется в зависимости от концентрации раствора и размера молекулы. Чем меньше молекула и выше концентрация, тем быстрее всасывание. То, что скорость всасывания из внутримышечных тканей неодинакова и варьируется для разных веществ, следует из экспериментов Мельцера и Ауэра (58). Разница была весьма заметной между внутримышечным и подкожным введением кураре или адреналина; результаты были несколько иными с морфином и флуоресцеином. Как показано в их протоколах, начало симптомов после внутримышечной инъекции морфина наступало быстрее, чем после подкожной инъекции, но со временем разница уменьшается и исчезает вовсе. Всасывание флуоресцеина происходит гораздо быстрее при использовании внутримышечного пути, чем при подкожном введении, но авторы отмечают, что скорость значительно уступает внутривенному введению. Разница в токсичности, которую мы наблюдали между кормлением через рот и подкожной инъекцией, хотя и отчетлива, была не очень велика. Она была намного меньше, чем та, которую Морель (55) получил с гидробромидом кофеина у кролика. Является ли эта разница между его результатами и нашими следствием использования чистого алкалоида в наших экспериментах и гидробромида, применявшегося Морелем, в настоящее время с какой-либо степенью точности утверждать нельзя. Есть надежда, что работа, проводимая в лаборатории, прольет некоторый свет на этот вопрос в ближайшем будущем. Однако эксперименты Мореля (56) показывают, что различные вещества ведут себя по-разному в этом отношении. Так, токсичность стрихнина, по его словам, в три раза выше при подкожном введении, чем при введении через рот, и в шесть раз превышает минимальную летальную дозу при внутривенном введении. Можно заметить, однако, что изучение его данных показывает, что его дозы слишком велики для кролика. В экспериментах с другими препаратами было замечено мало различий или их отсутствие между двумя способами введения. Так, дигиталин был лишь немного активнее при подкожном введении, чем через рот, в то время как токсичность гидрохлорида эметина была точно такой же, независимо от того, какой из этих методов введения вещества использовался. Различия в токсичности веществ также наблюдались между подкожным и внутривенным способами введения, но и здесь различия для разных веществ были неодинаковыми.

ЭКСПЕРИМЕНТЫ НА МОРСКИХ СВИНКАХ.

Токсичность кофеина изучалась на большом количестве особей. Эксперименты проводились на взрослых животных и выполнялись в разное время года различными способами. Особое внимание уделялось диете как возможному фактору, влияющему на устойчивость к кофеину, а также влиянию различных способов введения на токсичность. Поэтому некоторых животных кормили овсом, некоторых морковью, другие получали как сено, так и овес. Кофеин вводили подкожно, внутрибрюшинно и через рот.

ПОДКОЖНАЯ ИНЪЕКЦИЯ.

Серия A.

Предварительные эксперименты, проведенные на трех морских свинках, которые получили 360, 300 и 290 мг кофеина на килограмм подкожно, показали, что такие дозы были быстро летальными. Двое животных были охвачены судорогами через полчаса после введения кофеина и погибли во время приступа. У третьего через две минуты после инъекции кофеина начался столбняк. Последовали повторяющиеся приступы, которые закончились смертью животного два с половиной часа спустя. Летальные и токсические дозы, следовательно, должны быть значительно ниже 0,3 грамма кофеина на килограмм при введении этим путем, поэтому вводились меньшие дозы. Результаты показаны в экспериментах следующей серии.

Серия B.

Эксперименты с 2 дециграммами на килограмм составили эту серию.

Guinea pig 20. Female. Weight, 497 grams. Diet, oats.

2 апреля: 5 куб. см 2-процентного кофеина введено подкожно в 11:30 утра; 13:50, спазм кратковременного характера. Погибла в 15:00, через три с половиной часа после инъекции.

Guinea pig 38. Brown male. Weight, 570 grams. Diet, carrots and oats week previous to injection.

11 февраля: 15:50, 6 куб. см 2-процентного кофеина введено подкожно в спину (210 мг на килограмм); 16:15, рефлексы усилены, при беспокойстве наблюдались кратковременные судороги; 16:45, при прикосновении — повторяющиеся судороги и паралич; 17:00, морская свинка лежит на боку, дыхание затрудненное и тяжелое.

February 11: 5.05 p. m., guinea pig found dead, 2 hours and 15 minutes after injection.

Guinea pig 37. Male. Weight, 820 grams. Diet, carrots and oats during week preceding the injection of caffein.

11 февраля: 15:35, 8,5 куб. см 2-процентного кофеина введено подкожно в спину; 17:00, свинка очень чувствительна, передние конечности парализованы при прикосновении, частые спазмы задних конечностей, до 17:00 симптомов не замечено, хотя наблюдение велось постоянно; 17:05, морская свинка на ногах и выглядит нормально. При прикосновении приступа нет.

12 февраля: 9:00, найдена мертвой; погибла в течение 18 часов.

Guinea pig 13. Female. Weight, 618 grams. Diet, oats.

March 29: 2.45, 6 cc 2 per cent caffein injected subcutaneously (0.194 grams per kilo).

March 30: Died at 4 p. m., 25 hours after injection.

Guinea pig 36. Male. Weight, 850 grams. Fed oats and carrots for one week previous to injection.

11 февраля: 15:30, 8,5 куб. см 2-процентного кофеина введено подкожно в спину; 17:00, несколько более чувствительна, чем обычно, других симптомов нет, реакции на прикосновение нет; 17:05, симптомов нет.

12 февраля: 9:00, найдена мертвой, примерно через 18 часов после инъекции.

Результаты этих экспериментов, наблюдавшиеся у пяти морских свинок, показывают, что два дециграмма кофеина на килограмм веса животного вызывают симптомы в течение от получаса до примерно двух с четвертью часов после инъекции. Смерть наступила у двух морских свинок через 70 минут – 1 час после первых проявлений симптомов. Две другие погибли ночью, в то время как одна прожила 25 часов после инъекции кофеина. Таким образом, даже 2 дециграмма кофеина на килограмм веса могут быть летальными для морской свинки. Однако эксперименты, проведенные позже, показали, что устойчивость к кофеину у некоторых морских свинок заметно выше. Это подтверждается следующими экспериментами, в которых дозы от 0,2 до 0,24 грамма кофеина на килограмм вводились тем же путем.

Серия C.

Guinea pig 66. Yellow and dark brown male. Weight, 510 grams. Diet, oats.

4 октября: 5 куб. см 2-процентного кофеина (0,2 грамма на килограмм) введено подкожно в спину в 15:00; 17:00, симптомов нет.

5 октября: 9:00, жива; состояние хорошее.

9 октября: Найдена мертвой. Вскрытие: Застойные явления в печени, почках и тонкой кишке.

Guinea pig 65. White and black male. Weight, 510 grams. Diet, oats.

4 октября: 5 куб. см 2-процентного кофеина (0,2 грамма на килограмм) введено подкожно в спину в 15:00; 17:00, симптомов нет.

5 октября: 9:00, состояние хорошее.

Guinea pig 60. White and gray female. Weight, 320 grams. Diet, oats.

3 октября: 14:25, 3,5 куб. см 2-процентного кофеина (0,219 грамма на килограмм) введено подкожно в спину; 15:40, судороги с последующим восстановлением; 15:50, частые спазмы с параличом, особенно передних конечностей; 17:30, столбняк при извлечении из клетки и помещении на пол.

4 октября: 8:50, найдена мертвой. Вскрытие: Застойные явления в тонких кишках, легких, печени.

Guinea pig 57. White and gray female. Weight, 350 grams. Diet, oats.

3 октября: 14:15, 3,5 куб. см 2-процентного кофеина введено подкожно в спину (0,2 грамма на килограмм); 15:40, судороги с последующим восстановлением; 17:30, выраженных симптомов нет.

4 октября: 8:50, жива, активна.

6 октября: Найдена мертвой в 9:00. Вскрытие: Застойные явления в легких и печени; почки с петехиями; тяжелый гастроэнтерит.

Guinea pig 68. Yellow male. Weight, 785 grams. Diet, oats.

6 октября: 11:35, 7,8 куб. см 2-процентного кофеина (0,2 грамма на килограмм) введено подкожно; 12:00, рефлексы заметно усилены; 16:20, рефлексы такие же, как в 12:00.

7 октября: 9:00, мертва. Вскрытие: Легкие полнокровны; печень полнокровна и жирно перерождена; селезенка полнокровна, почка с геморрагическими пятнами; слизистая оболочка желудка некротизирована; небольшой участок тонкой кишки воспален.

Guinea pig 69. White male. Weight, 585 grams. Diet, oats.

6 октября: 11:40, 5,8 куб. см 2-процентного кофеина введено подкожно; 12:00, рефлексы усилены, но не так сильно, как у № 68; 16:20, морская свинка гиперчувствительна, рефлексы усилены больше, чем в 12:00.

7 октября: 9:00, жива.

15 октября: 9:00, найдена мертвой.

Guinea pig 61. Brown and black female. Weight, 330 grams. Diet, oats.

3 октября: 16:00, 4 куб. см 2-процентного кофеина (240 мг на килограмм) введено подкожно; 17:30, рефлексы усилены; бегает, но волочит задние конечности.

4 октября: 8:50, найдена мертвой.

Guinea pig 62. White, yellow, and black female. Weight, 335 grams. Diet, oats.

3 октября: 16:05, 4 куб. см 2-процентного кофеина (238 мг на килограмм) введено подкожно в спину; 17:00, судороги; 17:20, судороги, чередующиеся с параличом передних и задних конечностей.

4 октября: 8:50, найдена мертвой.

Guinea pig 70. White and brown male. Weight, 545 grams. Diet, oats.

7 октября: 15:00, 6,5 куб. см 2-процентного кофеина (238 мг на килограмм) водного раствора введено подкожно; 15:50, рефлексы усилены.

9 октября: 9:00, найдена мертвой.

Guinea pig 71. Brown and white male. Weight, 540 grams. Diet, oats.

7 октября: 15:00, 6,5 куб. см 2-процентного раствора кофеина (0,24 грамма на килограмм) введено подкожно; 15:45, рефлексы усилены, столбняк.

9 октября: 9:00, найдена мертвой.

Guinea pig 72. Brown and white male. Weight, 560 grams. Diet, oats.

7 октября: 15:00, 6,5 куб. см 2-процентного кофеина (0,232 грамма на килограмм) водного раствора введено подкожно; 15:35, рефлексы усилены.

October 10: found dead. Autopsy: Nos. 70, 71, 72 showed congestion of organs.

Реакция на кофеин в экспериментах этой серии (C) показала значительную вариативность. Появление симптомов, а также конечный исход экспериментов заметно различались в ряде случаев, несмотря на то, что условия были одинаковыми; так, введение 0,2 грамма на килограмм морским свинкам, которые получали одинаковый рацион, не вызвало симптомов у двух животных (№ 66 и 65), в то время как у четырех других наблюдались выраженные симптомы; у двух из них симптомы появились через час пятнадцать минут после инъекции, а у двух других (№ 68 и 69) легкие симптомы появились только через 20 или 25 минут. Последние две находились под наблюдением еще 4 часа, но видимых изменений в их состоянии не было. Продолжительность жизни всех этих морских свинок, как указано в таблице, также варьировалась. Две (№ 60 и 68) погибли в ночь после получения кофеина, одна выжила (№ 65), а три другие (№ 57, 66 и 69) прожили соответственно 2,5, 5 и 9 дней. Эксперименты с большими дозами также показали различия в поведении этих животных по отношению к кофеину, но они были не столь выражены. Как показано в таблице, симптомы появлялись через 35 минут – 1,5 часа после инъекции. Продолжительность жизни составляла менее 1 дня у двух свинок, примерно вдвое дольше у двух других, и в одном случае – от 2 до 3 дней.

Сравнение с результатами, полученными в предыдущей серии, показывает поразительную разницу в устойчивости к кофеину. Поскольку 2 дециграмма на килограмм оказались более быстро летальными для морской свинки, чем большие дозы, использованные в более поздних экспериментах, эта разница в устойчивости к кофеину может быть обусловлена несколькими факторами. Как отмечалось в экспериментах на кроликах, возраст может быть важным фактором, влияющим на токсичность кофеина. К сожалению, точных данных о возрасте морских свинок не было, но все они были, по-видимому, взрослыми, хотя и значительно различались по весу. Разница в их возрасте, по всей вероятности, была невелика. Более того, можно заметить, что устойчивость в сериях B и C различалась у животных примерно одинакового веса. Это очевидно при сравнении экспериментов № 20, 38 и 13 серии B с № 65, 66 и 69 следующей серии. Опять же, дальнейший осмотр и анализ этих таблиц не показывают разницы в токсичности, хотя может существовать значительная разница в весе, из чего можно сделать вывод, что животные были примерно одного возраста или что это не играет никакой роли в устойчивости к кофеину у морской свинки.

Диета — еще один фактор, который следует учитывать в этой связи. Недавняя работа Ханта (39) указывает на то, что это может влиять на устойчивость животных к некоторым ядам. Наши эксперименты, однако, не показывают никакой разницы в токсичности кофеина у морских свинок, независимо от того, получали ли они овес, морковь или и то, и другое, поскольку на одной и той же диете были получены разные результаты, и, по-видимому, не было никакой разницы в токсичности кофеина при разной диете. Напрашиваются другие объяснения полученных результатов. Сезонные изменения были названы рядом исследователей причиной вариативности устойчивости к лекарственным препаратам. Согласно Фоке (24), лягушки более восприимчивы к дигиталису весной, чем летом, в то время как Мошкович (61) и Эдмундс (21) сообщили о прямо противоположных результатах. Наблюдения Шмидеберга (80) за строфантином у лягушек согласуются с наблюдениями Эдмундса (21) и Мошковича (61). Аналогичные результаты были получены при работе с морскими свинками. Эксперименты Харрингтона (34) показывают, что стимуляция блуждающего нерва менее эффективна с октября по январь, чем с февраля по апрель, когда они также гораздо более восприимчивы к оперативным вмешательствам. Хант обнаружил, что устойчивость морских свинок к ацетонитрилу примерно в два раза выше в летние месяцы, чем в январе и феврале.

Порода также может считаться важным фактором в этой связи. Поскольку морские свинки, использовавшиеся в разное время года, относились к нескольким разновидностям, нет оснований полагать, однако, что разновидности, с которыми экспериментировали летом, были более устойчивы, чем те, что использовались зимой и весной. Поэтому весьма вероятно, что большая устойчивость к кофеину морских свинок серии C по сравнению с серией B была обусловлена сезонными изменениями.

Дозы от 0,20 до 0,24 грамма кофеина на килограмм веса, следовательно, могут рассматриваться как минимальная летальная доза для морской свинки, в зависимости от сезона. Поскольку 0,2 грамма на килограмм оказались быстро летальными в серии B, это количество, возможно, не было минимальной летальной дозой для морской свинки в сезон, когда проводились эксперименты. Поэтому в феврале и марте были проведены дополнительные тесты с меньшими дозами. Результаты показаны в серии D.

Серия D.

Guinea pig 49. Male. Weight, 510 grams. Diet, oats for 1 month previous to experiment.

17 марта: 15:00, 4 куб. см 2-процентного кофеина (0,16 грамма на килограмм) введено подкожно; 16:40, рефлексы усилены; 17:40, симптомов нет.

18 марта: 9:00, найдена мертвой, погибла менее чем за 18 часов. Вскрытие: Кровоизлияние в брюшную полость; печень и селезенка чрезмерно полнокровны; кишечник инъецирован; геморрагическая область в месте инъекции.

Guinea pig 40. Male. Weight, 630 grams. Diet, oats and carrots one week previous to injection.

February 12: 11 a. m., 5 cc 2 per cent caffein (0.158 gram per kilo) injected subcutaneously into back.

13 февраля: 13:00, все еще жива.

14 февраля: 9:00, найдена мертвой.

Guinea pig 45. Female. Weight, 435 grams. Diet, oats for about one month previous to injection.

17 марта: 15:00, 3,5 куб. см 2-процентного кофеина введено подкожно в спину (0,160 грамма на килограмм); 16:35, симптомов нет; 17:40, симптомов нет.

Guinea pig 39. Male. Weight, 820 grams. Diet, oats and carrots.

February 12: 11 a. m., 6 cc (0.15 gram per kilo) 2 per cent caffein injected subcutaneously in back.

14 февраля: 9:00, жива; казалось, в хорошем состоянии; найдена мертвой в 13:00.

Guinea pig 41. Weight, 660 grams. Diet, oats and carrots one week previous to injection.

February 12: 11 a. m., 5 cc (0.15 gram per kilo) 2 per cent caffein injected subcutaneously.

14 февраля: 14:00, свинка жива; по-видимому, нормальна.

18 февраля: Морская свинка все еще жива и, по-видимому, в хорошем состоянии.

Guinea pig 46. Female. Weight, 470 grams. Diet, oats about one month previous to experiment.

17 марта: 15:15, 4 куб. см (0,170 грамма на килограмм) 2-процентного кофеина введено в спину подкожно; 16:35, рефлексы усилены, тремор при прикосновении выражен; 17:40, без изменений, симптомы примерно такие же, как раньше.

18 марта: 14:30, симптомов нет.

Эксперименты этой серии (D) также показали значительную разницу в устойчивости отдельных морских свинок. № 41, 45 и 46 выжили; остальные свинки погибли в течение от 18 часов до 2 дней после введения кофеина. Поскольку вскрытие проводилось только у одной, невозможно установить причину вариативности токсичности кофеина у этих морских свинок, так как диета и другие условия, в которых проводились эксперименты, были одинаковыми. В экспериментах на кошках и кроликах было обнаружено, что наличие болезненных процессов имеет тенденцию увеличивать токсичность кофеина. Наблюдения Офюльса (66) представляют интерес в этой связи. Он обнаружил спонтанные поражения почек и печени у большой доли исследованных морских свинок. Большая восприимчивость к кофеину морских свинок № 39, 40, 49, вероятно, обусловлена каким-то патологическим изменением, которое увеличило его токсичность. Таким образом, от 0,2 до 0,24 грамма на килограмм можно рассматривать как минимальную летальную дозу для нормальной морской свинки при подкожном введении кофеина, при этом минимальная токсическая доза составляет около 150–160 мг на килограмм.

Также были проведены эксперименты по определению наибольшей дозы, которая не вызывает никаких видимых эффектов. В ряде тестов с дозировкой от 100 до 120 мг кофеина на килограмм (серия E, см. табл. 6, стр. 51) не наблюдалось ни проявлений нервных или мышечных нарушений, ни каких-либо отклонений от нормы в дыхательной активности. Такие количества можно рассматривать как наибольшие дозы, которые безусловно безопасны для этих животных. Вполне возможно, следовательно, что большая вариативность токсичности кофеина, наблюдаемая в этих экспериментах, обусловлена болезненными состояниями. Более того, существуют некоторые доказательства того, что кофеин увеличивает токсичность некоторых ядов, как показал Хейл (33) для ацетанилида. Невозможно ли, что кофеин может аналогичным образом подвергаться воздействию ядов, циркулирующих в организме? Действительно, недавняя работа Леба (23) делает это предположение весьма вероятным. Этот исследователь обнаружил, что кофеин и адреналин, введенные вместе, вызывают миокардит у кролика. Вполне вероятно, что комбинированное действие кофеина и какого-либо уже существующего яда может вызвать изменения, которые заканчиваются смертью животного. Отсроченная смерть морских свинок после введения кофеина, наблюдаемая в этой и других сериях, вероятно, может быть объяснена таким образом.

Эксперимент 57 дает некоторое подтверждение этой точке зрения. Состояние почек и наличие тяжелого гастроэнтерита достаточны, чтобы объяснить смерть в этом случае. Опять же, частая связь гастроэнтерита и застойных явлений в органах при интоксикации кофеином, обнаруженная у разных животных, делает весьма вероятным, что эти поражения были вызваны кофеином.

ВВЕДЕНИЕ В БРЮШНУЮ ПОЛОСТЬ.

Эксперименты проводились с различными дозами. Все морские свинки в этой серии содержались на однообразной диете, состоящей из овса. Большинство из них были среднего размера, и не было больших различий в их весе. Эксперименты серии A с наименьшими дозами проводились в марте и апреле; все остальные эксперименты, как можно заметить, были сделаны в октябре.

Серия A.

Guinea pig 41. Weight, 700 grams. Diet, oats.

1 апреля: 15:30, 4,5 куб. см 2-процентного кофеина (130 мг на килограмм) введено в брюшную полость. 17:35, симптомы присутствуют, но столбняка нет.

2 апреля: Найдена мертвой около 14:00, продолжительность жизни около 22 часов. Вскрытие: Подкожное кровоизлияние в месте инокуляции; серозный экссудат на висцеральной и париетальной брюшине с выраженным воспалением брюшины; участки кишечника показали легкий энтерит.

Guinea pig 49. Male. Weight, 370 grams. Diet, oats.

1 апреля: 15:15, 2,5 куб. см 2-процентного кофеина (135 мг на килограмм) введено в брюшную полость; 17:30, симптомы присутствуют; рефлексы усилены, но столбняка нет. Морская свинка выжила.

Guinea pig 47. Female. Weight, 550 grams. Diet, oats since about February 4.

17 марта: 15:30, 3,5 куб. см 2-процентного кофеина (127 мг на килограмм) введено в брюшную полость; 16:35, повышенная раздражительность присутствует, но не выражена; 17:40, симптомы примерно такие же, как раньше.

18 марта: 14:30, состояние хорошее; симптомов нет. Выжила.

Guinea pig 50. Female. Weight, 290 grams. Diet, oats.

1 апреля: 15:30, 2 куб. см 2-процентного кофеина (138 мг на килограмм) введено в брюшную полость; 17:35, симптомы присутствуют; рефлексы значительно усилены, но столбняка нет. Выжила.

Серия B.

Guinea pig 51. Yellow female. Weight, 415 grams.

1 октября: 9:50, 3 куб. см (144 мг на килограмм) 2-процентного кофеина введено в брюшную полость; 16:30, симптомов нет, хотя находилась под наблюдением весь день.

3 октября: 14:00, жива.

Guinea pig 52. White male. Weight, 450 grams.

1 октября: 9:45, 3,5 куб. см, 2-процентного кофеина (155 мг на килограмм), введено в брюшную полость; 16:30, с момента инъекции симптомы не развились.

3 октября: 14:00, жива.

Guinea pig 58. Brown and white male. Weight, 490 grams.

1 октября: 9:45, 4 куб. см, 2-процентного кофеина (163 мг на килограмм), введено в брюшную полость; 16:30, с момента инъекции симптомы не развились.

3 октября: 14:00, жива.

8 октября: Найдена мертвой. Вскрытие: Застойные явления в легких, селезенке, печени, почках и тонкой кишке.

Серия C.

Guinea pig 59. Gray and white. Weight, 375 grams. Diet, oats.

3 октября: 14:00, 3,75 куб. см (0,2 грамма на килограмм) введено в брюшную полость; 14:15, рефлексы усилены, но не выраженно; 16:00, рефлексы еще более усилены; других симптомов нет; 17:30, симптомов нет.

4 октября: 8:50, морская свинка жива и активна.

Guinea pig 58. Brown and white. Weight, 380 grams. Diet, oats.

3 октября: 14:00, 3,8 куб. см кофеина (0,2 грамма на килограмм), 2-процентного раствора, введено в брюшную полость; 14:10, задние ноги вытянуты, затем столбняк; приступ длился несколько секунд, после чего свинка поднялась на ноги, но рефлексы остались сильно преувеличенными; с 16:00 до 17:30 симптомов интоксикации кофеином нет.

4 октября: 8:50, морская свинка жива и активна.

Guinea pig 56. Gray and white male. Weight, 440 grams. Diet, oats.

1 октября: 11:30, получила 4,6 куб. см 2-процентного раствора кофеина (0,2 грамма на килограмм) в брюшную полость; 11:45, скованность и ригидность задних конечностей, рефлексы усилены; 12:30, задние ноги парализованы, рефлексы усилены; 16:35, симптомов нет, морская свинка в хорошем состоянии.

3 октября: Все еще жива в хорошем состоянии.

14 октября: Погибла. Вскрытие: Передняя доля правого легкого гепатизирована. Небольшой участок тонкой кишки отечен. Другие органы в норме.

Guinea pig 55. White and yellow male. Weight, 690 grams. Diet, oats.

1 октября: 11:30, получила 6,5 куб. см 2-процентного раствора кофеина (188 мг на килограмм) в брюшную полость; 11:40, скованность во всех конечностях, рефлексы заметно усилены; 12:30, рефлексы усилены, передние и задние конечности парализованы; 15:00, найдена мертвой.

Серия D.

Guinea pig 67. Gray and yellow male. Weight, 330 grams. Diet, oats.

5 октября: 11:25, 4 куб. см 2-процентного кофеина введено в брюшную полость (240 мг на килограмм); 11:30, столбняк — выжила, судороги периодически. Смерть в 14:55. Вскрытие: Тяжелый гастроэнтерит; почки с петехиями; застойные явления в легких и печени.

Guinea pig 63. Gray and white male. Weight, 340 grams. Diet, oats.

October 5: 11.20 a. m., 4 cc of 2 per cent caffein (235 mg per kilo) injected into peritoneal cavity.

14 октября: Жива и в хорошем состоянии.

Guinea pig 64. Brown and black female. Weight, 305 grams.

5 октября: 11:35, 3,8 куб. см 2-процентного раствора кофеина (250 мг на килограмм) введено в брюшную полость; 11:40, столбняк — выжила, судороги периодически, погибла в 16:15. Вскрытие: Результаты точно такие же, как у № 67.

Изучение результатов экспериментов с внутрибрюшинными инъекциями показало, что 0,2 грамма кофеина на килограмм были токсичны для двух морских свинок (№ 59 и 58). Тяжелые симптомы наблюдались в течение 15 минут у № 56 и в течение одного часа у № 55 после введения примерно такой же дозы кофеина. Одна из них погибла в течение трех с половиной часов; другая, № 56, хорошо оправилась от острых эффектов. Это количество кофеина, следовательно, можно рассматривать как минимальную токсическую дозу для морской свинки при введении в брюшную полость. Это подтверждается экспериментами серии B, в которых меньшие дозы не вызывали никаких мышечных, нервных или дыхательных симптомов, не было также замечено никаких последствий, так как все они выжили и находились под наблюдением некоторое время. Морские свинки серии A, однако, по-видимому, противоречат этим результатам. Следует отметить, что заметно меньшие дозы вызывали симптомы у всех из них, и один случай закончился летально. Сезонная вариативность, как уже отмечалось, по всей вероятности, также ответственна за разницу в устойчивости между морскими свинками серий A и B. Также были проведены тесты для определения минимальной летальной дозы. Для этой цели были выполнены эксперименты серии D. Устойчивость № 63 в этой серии весьма поразительна. Мы не можем объяснить такое расхождение в результатах, полученных в практически одинаковых условиях. Минимальная летальная доза кофеина при введении в брюшную полость, следовательно, составляет около 240–250 миллиграммов на килограмм. Эти количества, как можно заметить, были быстро летальными, в поразительном контрасте с результатами, полученными при введении таких доз подкожно. Это, вероятно, связано с лучшим всасыванием из брюшной полости, чем из подкожных тканей.

ВВЕДЕНИЕ ЧЕРЕЗ РОТ.

Все морские свинки в этих экспериментах содержались на диете из сена и овса и были крупного размера. Тесты проводились с различными дозами кофеина, чтобы определить пределы токсичности при введении препарата через рот.

Guinea pig 129. White and black male. Weight, 855 grams. Diet, oats and hay.

6 июня: 14:20, 12 куб. см 2-процентного кофеина (0,28 грамма на килограмм) через рот; 15:00, рефлексы усилены; 17:00, рефлексы еще более усилены; других симптомов нет.

7 июня: 9:00, найдена мертвой; морская свинка выделила 75 куб. см мочи, которая была почти бесцветной. Вскрытие: Сердце и кровеносные сосуды инъецированы; легкие полнокровны; тонкие кишки полнокровны; другие органы, по-видимому, нормальны.

Guinea pig 130. Black and brown male. Weight, 800 grams. Diet, oats and hay.

6 июня: 14:30, 12 куб. см 2-процентного кофеина (0,3 грамма на килограмм) введено через рот; 15:00, рефлексы усилены; 17:00, усиление рефлексов больше, чем в 15:00.

7 июня: 9:00, найдена мертвой; с 16:00 выделилось лишь несколько кубических сантиметров мочи. Вскрытие: Сердце и кровеносные сосуды инъецированы; легкие полнокровны; тонкие кишки слегка полнокровны.

Guinea pig 181. White and yellow male. Weight, 860 grams. Diet, oats and hay.

6 июня: 14:40, 12 куб. см 2-процентного кофеина введено через рот; 15:00, рефлексы усилены; 17:00, рефлексы еще более выражены.

7 июня: 9:00, найдена мертвой, свинка выделила около 5 куб. см мочи с 16:00 предыдущего дня. Вскрытие: То же, что у № 130.

Guinea pig 136. White and black male. Weight, 1,000 grams. Diet, oats and hay.

9 июня: 16:00, 7,5 куб. см 2-процентного раствора кофеина введено подкожно в спину; 16:50, рефлексы усилены.

10 июня: 9:30, более чувствительна, чем нормальные морские свинки, но рефлексы не столь выражены, как в 17:00 предыдущего дня, выделилось около 15 куб. см мочи с момента инъекции кофеина, восстановление реактива Фелинга значительное, белка нет.

13 июня: Жива и в хорошем состоянии. Аппетит хороший. (Примечание. — Параллельный тест с мочой двух морских свинок, которые не получали кофеин, не показал восстановления реактива Фелинга.)

Guinea pig 137. White and brown male. Weight, 925 grams. Diet, oats and hay.

June 9: 4 p. m., 7 cc 2 per cent solution caffein injected subcutaneously; 4.50 p. m., reflexes increased.

10 июня: Рефлексы менее выражены, чем в 17:00 предыдущего дня, но более чувствительна, чем нормальная морская свинка, выделилось около 10 куб. см мочи с момента инъекции кофеина, умеренное количество восстановления реактива Фелинга.

13 июня: Морская свинка жива, аппетит хороший, состояние хорошее.

16 июня: 9:00, найдена мертвой.

Guinea pig 135. White and black male. Weight, 955 grams. Diet, hay and oats.

9 июня: 15:00, 7,5 куб. см 2-процентного раствора кофеина дано через рот с помощью желудочного зонда; 16:50, рефлексы усилены.

10 июня: Рефлексы меньше, чем в предыдущий день, и менее выражены, чем у № 136, собрано несколько кубических сантиметров грязно-коричневой мочи, но проверить на восстановление не удалось.

13 июня: Состояние хорошее, аппетит хороший.

16 июня: 9:00, найдена мертвой.

Guinea pig 134. White and brown male. Weight, 740 grams. Diet, hay and oats.

9 июня: 14:55, 6 куб. см теплого 2-процентного раствора кофеина дано через рот с помощью желудочного зонда; 16:50, рефлексы усилены.

10 июня: 9:30, рефлексы намного меньше, чем днем ранее, усиление незначительное, выделилось несколько кубических сантиметров мочи с момента инъекции кофеина, выглядела коричневой и грязной, проверить на восстанавливающие вещества не удалось.

13 июня: Морская свинка жива, аппетит хороший, состояние хорошее.

14 июня: 9:00, найдена мертвой.

Guinea pig 128. White and black male. Weight, 1,075 grams. Diet, hay and oats.

7 июня: 10:00, 11 куб. см 2-процентного кофеина через рот с помощью желудочного зонда; 11:10, симптомов нет, моча не выделялась; 13:00, усиленные рефлексы, выделилось около 15 куб. см (оценочно) мочи; 16:00, рефлексы усилены, выделилось еще больше мочи (около 20 куб. см); 16:50, столбняк, частые приступы, затем паралич и смерть в 16:58. Вскрытие: Легкие полнокровны; кровеносные сосуды сердца инъецированы; кишечник слегка полнокровен; жирная печень.

Guinea pig 126. White and gray male. Weight, 980 grams. Diet, oats and hay.

7 июня: 9:40, 9,8 куб. см 2-процентного кофеина дано через рот с помощью желудочного зонда; 10:00, симптомов нет; 11:10, моча не выделялась, рефлексы усилены; 13:00, более чувствительна, чем раньше; 16:00, усиление рефлексов более выражено, моча не выделялась; 16:45, собрано около 15 куб. см мочи; 17:00, без изменений.

8 июня: 9:00, рефлексы примерно такие же, как в 17:00 предыдущего дня, моча не выделялась с 16:45 предыдущего дня, значительное восстановление реактива Фелинга, намного больше, чем в моче морской свинки № 127; 11:05, судороги; 12:00, все еще жива и вытянута на животе; погибла в 13:00. Вскрытие: Легкие сильно полнокровны; сердце и кровеносные сосуды инъецированы; кровеносные сосуды почки и тонких кишок инъецированы; печень переполнена кровью; несколько некротических пятен в желудке.

Guinea pig 127. White, black, and brown male. Weight, 760 grams. Diet, oats and hay.

7 июня: 9:50, 7,6 куб. см 2-процентного кофеина через рот с помощью желудочного зонда; 10:00, симптомов нет; 11:10, рефлексы усилены, моча не выделялась; 13:00, очень чувствительна; 16:00, чувствительность усилена, выделилось около 20 куб. см мочи; 17:00, без изменений.

8 июня: 9:00, рефлексы примерно такие же, как в 17:00 предыдущего дня; 9:30, морская свинка выделила 30 куб. см мочи с момента получения кофеина, моча показала умеренное количество восстановления; 12:00, судороги; погибла в 14:30. Вскрытие: Легкие полнокровны; кровеносные сосуды сердца и кишечника инъецированы; многочисленные некротические пятна в желудке; другие органы, по-видимому, нормальны.

Изучение протоколов показывает, что всасывание кофеина из желудочно-кишечного тракта было довольно быстрым, симптомы наблюдались уже через 20 минут после его введения. Продолжительность жизни, как можно заметить, варьировалась в зависимости от размера дозы. Когда скармливалось примерно 3 дециграмма на килограмм, все животные погибали ночью. Таким образом, они жили менее 18 часов. 2 дециграмма на килограмм были также летальными, но продолжительность жизни была больше. Чтобы решить, является ли это наименьшей летальной дозой, скармливались меньшие количества. Сначала казалось, что около 150 мг на килограмм — это наименьшая токсическая доза, а около 200 мг на килограмм — минимальная летальная доза. Макроскопическое исследование органов, однако, вызвало некоторые сомнения в этом предположении, так как хорошо выраженные поражения были замечены у всех морских свинок, которые получили 0,2 грамма на килограмм. Вполне возможно, следовательно, что минимальная летальная доза может быть несколько выше, так как у нас есть основания полагать, что, по крайней мере, при некоторых патологических состояниях восприимчивость к кофеину повышена. Наличие жировых изменений в печени у № 128 и быстрая смерть в этом случае дают особое подтверждение этой точке зрения. Следовательно, минимальная летальная доза, вероятно, больше 0,2 грамма на килограмм для нормальной морской свинки. Дозы, использованные для тестов на морских свинках № 129, 130 и 131, могут, следовательно, считаться минимальной летальной дозой для этих животных. Также можно заметить, что макроскопическое исследование органов этих животных не выявило наличия тяжелых поражений. То, что минимальная токсическая доза, вероятно, намного меньше 0,28 грамма на килограмм, указывают эксперименты на морских свинках № 135 и 134, в которых 0,15 грамма кофеина на килограмм вызывали легкие симптомы в течение от двух до трех часов. Обе они, однако, а также № 137, погибли через четыре-шесть дней после того, как препарат был скормлен. Как уже отмечалось, кофеин может быть фактором отсроченной смерти морских свинок, которые получили его умеренные дозы. То, что это предположение может быть верным и для морских свинок № 134, 135 и 137, действительно становится вероятным благодаря наблюдению, что после умеренных количеств кофеина симптомы могут сохраняться у морской свинки в течение примерно 24 часов, а также благодаря тому факту, что секреция мочи у этих животных была очень скудной, как показано в предыдущей записи экспериментов; это означает медленное выведение кофеина и продуктов его разложения. Вполне вероятно, что присутствие токсических количеств кофеина в организме в течение значительного времени вызвало бы изменения, которые в конечном итоге привели бы к смерти животного, или что болезненные процессы запускаются комбинированным действием кофеина и какого-либо уже существующего яда. Поскольку некоторые морские свинки, однако, пережили указанные дозы, более вероятно, что такие изменения были бы вызваны кофеином в присутствии уже существующего яда. Смерть этих свинок, а также № 137 несколько дней спустя, трудно объяснить какой-либо другой теорией, кроме предложенной. Если бы не тот факт, что контрольные животные, то есть животные той же партии, которые не получали кофеин, пережили всех экспериментальных животных, измененные условия окружающей среды или несчастный случай могли бы считаться причиной смерти морских свинок последней серии.

Таблица 6. — Подкожная инъекция морским свинкам.

SERIES A. Number of pig. Weight.Caffein per kiloAppearance of symptoms inDuration of life. Diet. Month. Remarks. Grams. Mg. 18 500 0.300 2 minutes2 hours 40 minutes CarrotsMarchFemale. 15 548 .29030 minutes Oats do. Do. 14 442 .360 15 minutes do. do. do. Do. SERIES B. 20 497 0.2002 hours 20 minutes3 hours 30 minutes OatsAprilFemale. 38 570 .210 25 minutes2 hours 15 minutes CarrotsFebruaryMale. 37 820 .2001 hour 25 minutesLess than 18 hoursCarrots and oats. do. Do. 13 618 .19425 hoursOatsMarchFemale. 36 850 .200 1 hour 30 minutes 18 hoursCarrots and oats.FebruaryMale. SERIES C. 66 510 0.200None5 daysOatsOctoberMale. 65 510 .200 do.Survived do. do. do. 60 320 .2191 hour 15 minutesWithin 18 hours do. do.Female. 57 350 .200 do.About 2½ days do. do. Do. 68 785 .200 25 minutesLess than 22 hours do. do.Male. 69 585 .200 20 minutes9 days do. do. Do. 61 330 .2401 hour 30 minutesLess than 24 hours do. do.Female. 62 335 .2381 hour do. do. do. Do. 70 545 .238 50 minutesAbout 2 days do. do.Male. 71 540 .240 45 minutes do. do. do. Do. 72 560 .232 35 minutesAbout 3 days do. do. Do. SERIES D. 49 510 0.1601 hour 40 minutesLess than 18 hoursOatsMarchMale. 40 630 .158 Less than 2 daysOats and carrots.February Do. 45 435 .160 None SurvivedOatsMarchFemale. 39 820 .150 2 daysOats and carrots.FebruaryMale. 41 660 .150 Survived do. do. 46 470 .1701 hour 20 minutes do.Oats (?)MarchFemale. SERIES E. 19 556 0.100Survived OatsApril 42 490 .120 None do. do.February 43 430 .116 do. do. do. do. 44 535 .112 do. do. do. do. 97 330 .100 do. do. do.November 98 520 .100 do.About 3 days Carrots do.

SERIES A. Number of pig. Weight.Caffein per kiloAppearance of symptoms in Grams. Mg. 18 500 0.300 2 minutes 15 548 .290 14 442 .360 15 minutes Number of pig.Duration of life. Diet. Month. Remarks. 182 hours 40 minutes CarrotsMarchFemale. 1530 minutes Oats do. Do. 14 do. do. do. Do. SERIES B. Number of pig. Weight.Caffein per kiloAppearance of symptoms in Grams. Mg. 20 497 0.2002 hours 20 minutes 38 570 .210 25 minutes 37 820 .2001 hour 25 minutes 13 618 .19425 hours 36 850 .200 1 hour 30 minutes Number of pig.Duration of life. Diet. Month. Remarks. 203 hours 30 minutes OatsAprilFemale. 382 hours 15 minutes CarrotsFebruaryMale. 37Less than 18 hoursCarrots and oats. do. Do. 13OatsMarchFemale. 36 18 hoursCarrots and oats.FebruaryMale. SERIES C. Number of pig. Weight.Caffein per kiloAppearance of symptoms in Grams. Mg. 66 510 0.200None 65 510 .200 do. 60 320 .2191 hour 15 minutes 57 350 .200 do. 68 785 .200 25 minutes 69 585 .200 20 minutes 61 330 .2401 hour 30 minutes 62 335 .2381 hour 70 545 .238 50 minutes 71 540 .240 45 minutes 72 560 .232 35 minutes Number of pig.Duration of life. Diet. Month. Remarks. 665 daysOatsOctoberMale. 65Survived do. do. do. 60Within 18 hours do. do.Female. 57About 2½ days do. do. Do. 68Less than 22 hours do. do.Male. 699 days do. do. Do. 61Less than 24 hours do. do.Female. 62 do. do. do. Do. 70About 2 days do. do.Male. 71 do. do. do. Do. 72About 3 days do. do. Do. SERIES D. Number of pig. Weight.Caffein per kiloAppearance of symptoms in Grams. Mg. 49 510 0.1601 hour 40 minutes 40 630 .158 45 435 .160 None 39 820 .150 41 660 .150 46 470 .1701 hour 20 minutes Number of pig.Duration of life. Diet. Month. Remarks. 49Less than 18 hoursOatsMarchMale. 40 Less than 2 daysOats and carrots.February Do. 45 SurvivedOatsMarchFemale. 39 2 daysOats and carrots.FebruaryMale. 41 Survived do. do. 46 do.Oats (?)MarchFemale. SERIES E. Number of pig. Weight.Caffein per kiloAppearance of symptoms in Grams. Mg. 19 556 0.100 42 490 .120 None 43 430 .116 do. 44 535 .112 do. 97 330 .100 do. 98 520 .100 do. Number of pig.Duration of life. Diet. Month. Remarks. 19Survived OatsApril 42 do. do.February 43 do. do. do. 44 do. do. do. 97 do. do.November 98About 3 days Carrots do.