«Токсичность кофеина: экспериментальное исследование на различных видах животных»

Единственным изменением, замеченным во всех экспериментах этой серии, была прогрессирующая потеря массы, которая началась через 3–8 дней после начала введения препарата. Продолжительность жизни варьировалась значительно. № 382 умер после первой дозы. № 389 жил 2 дня, № 386 — 3 дня, и № 385 — 5 дней; № 390 жил 7 дней и № 404 жил 20 дней после начала введения кофеина. Продолжительность жизни у всех остальных была от 11 до 16 дней. Находки при вскрытии интересны и наводят на размышления относительно возможного объяснения эффектов повторного дозирования кофеина. У восьми кроликов было вовлечение слизистой оболочки желудка или кишечника, или обоих. Поскольку то же состояние желудочно-кишечного канала наблюдалось в предыдущих экспериментах с кофеином при подкожной инъекции, простое прохождение трубки в желудок очевидно не является причиной этого состояния. Летальный исход обусловлен, следовательно, как было предложено выше, истощением, вызванным состоянием желудочно-кишечного канала. Более того, параллельные эксперименты, проведенные на кроликах таким же образом с алкоголем, выживали после этого лечения гораздо дольше. Очевидно, тогда прохождение мягкого резинового катетера не является причиной этого состояния желудочно-кишечного канала, ни диета. Кролики питались овсом исключительно в течение нескольких месяцев в этой лаборатории и процветали. Наличие пневмонии у других кроликов этой серии может рассматриваться как случайное, так как немыслимо, чтобы одна или две дозы кофеина, как это было в случае № 382 и № 389, могли предрасполагать легкие к инфекции. Результаты этих экспериментов, следовательно, находятся в гармонии с результатами предыдущих двух серий, указывая на то, что кофеин не накапливается в организме, и что токсичность кофеина, будь то одиночная доза или повторные дозы, одинакова, на диете из моркови или овса. Эти результаты также показывают, что кофеин гораздо более токсичен при повторном дозировании. Как сказано в исторической части этого бюллетеня, того же мнения придерживался Гуревич (28).

Кролик 386. Бельгийская самка.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса через желудочный зонд.

Date. Weight. Treatment. Date. Weight. Treatment. Grams. cc. Grams. cc. Aug. 17 1,300 13.0 Aug. 19 (?) (?) Aug. 18 1,215 12.0

20 августа: найден мертвым в 9 часов утра. Вскрытие: легкие слегка гиперемированы; печень полнокровная и дряблая; желчный пузырь хорошо наполнен.

Кролик 389. Черный самец.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса через желудочный зонд.

Date. Weight. Treatment. Date. Weight. Treatment. Grams. cc. Grams. cc. Aug. 17 1,070 10.0 Aug. 18 1,025 10.0

19 августа: найден мертвым в 9 часов утра. Вскрытие: легкие сильно гиперемированы и частично гепатизированы; печень полнокровная; остальные органы выглядели нормально.

Кролик 382. Бельгийская самка.

17 августа весил 1035 граммов; получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов; всего введено 10 куб. см 1-процентного раствора кофеина.

18 августа: найден мертвым в 9 часов утра. Вскрытие: легкие гиперемированы и гепатизированы; печень полнокровная; на слизистой оболочке желудка обнаружены многочисленные петехиальные кровоизлияния; почки слегка гиперемированы; кишечник выглядел нормально.

Кролик 385. Бельгийская самка.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса через желудочный зонд.

Date. Weight. Treatment. Date. Weight. Treatment. Grams. cc. Grams. cc. Aug. 17 780 8.0 Aug. 20 715 7.0 Aug. 18 760 7.5 Aug. 21 700 7.0 Aug. 19 755 7.5

22 августа: найден мертвым в 9 часов утра. Вскрытие: в легких обнаружены пневмонические очаги с воспалением прилегающей плевры; вокруг легкого присутствует фиброзно-пластический экссудат; печень поражена кокцидиозом; желудок растянут содержимым; слизистая оболочка характеризуется катаральным воспалением; содержимое тонкой кишки жидкое, окрашено желчью; толстая кишка несколько уплотнена; печень и почки по виду нормальные.

Кролик 404. Белый самец.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса.

Date. Weight. Treatment. Date. Weight. Treatment. Grams. cc. Grams. cc. Aug. 20 1,465 14.5 Aug. 30 1,320 13.0 Aug. 21 1,475 14.5 Aug. 31 1,330 13.5 Aug. 221 Sept. 1 1,335 13.5 Aug. 23 1,475 14.5 Sept. 2 1,315 13.0 Aug. 24 1,400 14.0 Sept. 3 1,350 13.5 Aug. 252 1,405 14.0 Sept. 4 1,335 13.5 Aug. 26 1,415 14.0 Sept. 5 1,350 13.5 Aug. 27 1,400 14.0 Sept. 6 1,380 14.0 Aug. 281 Sept. 7 1,375 14.0 Aug. 29 1,310 13.0 Sept. 8 1,325 13.0

1 Не кормили. 2 Рефлексы.

9 сентября: найден мертвым в 9 часов утра. Вскрытие: в обоих легких обширная пневмония со спайками с плеврой; плеврит и перикардит очень выражены; большое количество фиброзного экссудата в плевральной полости; пилорический отдел желудка слегка гиперемирован; печень гиперемирована; остальные органы в норме.

Кролик 393. Бельгийский.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса через желудочный зонд.

Date. Weight. Treatment. Date. Weight. Treatment. Grams. cc. Grams. cc. Aug. 17 950 9.5 Aug. 25 835 8.5 Aug. 18 910 9.0 Aug. 26 780 8.0 Aug. 19 895 9.0 Aug. 27 765 7.5 Aug. 20 910 9.0 Aug. 281 Aug. 21 905 9.0 Aug. 29 710 Aug. 221 Aug. 302 Aug. 23 825 8.0 Aug. 311 Aug. 24 870 8.5

1 Не кормили. 2 Состояние очень плохое; не кормили.

1 сентября: найден мертвым. Вскрытие: легкие гиперемированы и припаяны к плевре; обширное воспаление плевры; печень слегка увеличена и гиперемирована; слизистая оболочка желудка и тонкой кишки слегка гиперемирована; остальные органы в норме.

Кролик 390. Бельгийский, самец.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса через желудочный зонд.

Date. Weight. Treatment. Date. Weight. Treatment. Grams. cc. Grams. cc. Aug. 17 1,490 15.0 Aug. 21 1,265 12.5 Aug. 18 1,370 14.0 Aug. 221 Aug. 19 1,365 13.5 Aug. 23 1,120 11.0 Aug. 20 1,340 13.5

1 Не кормили.

24 августа: найден мертвым в 9 часов утра. Вскрытие: сердце и легкие выглядели нормально; органы брюшной полости не показали видимых патологических изменений, за исключением кокцидиоза печени и наполненности кровеносных сосудов.

Кролик 392. Мальтийский, самка.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса через желудочный зонд.

Date. Weight. Treatment. Date. Weight. Treatment. Grams. cc. Grams. cc. Aug. 17 1,265 12.5 Aug. 26 1,140 11.5 Aug. 18 1,275 12.5 Aug. 27 1,140 11.5 Aug. 19 1,240 12.5 Aug. 281 Aug. 20 1,220 12.0 Aug. 29 1,115 11.0 Aug. 21 1,245 12.5 Aug. 30 1,080 11.0 Aug. 221 Aug. 31 1,020 10.0 Aug. 23 1,180 12.0 Sept. 1 995 10.0 Aug. 24 1,190 12.0 Sept. 2 930 9.0 Aug. 25 1,155 11.5

1 Не кормили.

Умер в 3 часа дня 2 сентября. Вскрытие: в желудке и тонкой кишке обнаружены многочисленные мелкие геморрагические пятна; содержимое желудка окружено толстым слоем слизи; остальные органы были по виду нормальными.

Кролик 403. Черный.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса.

Date. Weight. Treatment. Date. Weight. Treatment. Grams. cc. Grams. cc. Aug. 20 1,640 16.5 Aug. 26 1,390 14.0 Aug. 21 1,640 16.5 Aug. 27 1,330 13.5 Aug. 221 Aug. 281 Aug. 23 1,490 15.0 Aug. 29 1,130 11.5 Aug. 24 1,515 15.0 Aug. 30 1,055 10.5 Aug. 25 1,475 15.0

1 Не кормили.

31 августа: найден мертвым в 3 часа дня. Вскрытие: обширный гастроэнтерит; печень увеличена и гиперемирована; селезенка слегка гиперемирована; брюшина утолщена и гиперемирована; остальные органы в норме.

Кролик 884. Черный, самка.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса через желудочный зонд.

Date. Weight. Treatment. Date. Weight. Treatment. Grams. cc. Grams. cc. Aug. 16 1,195 12.0 Aug. 25 990 10.0 Aug. 17 1,205 12.0 Aug. 26 960 9.5 Aug. 18 1,140 11.5 Aug. 27 955 9.5 Aug. 19 1,180 12.0 Aug. 281 Aug. 20 1,145 11.5 Aug. 29 870 9.0 Aug. 21 1,145 11.5 Aug. 302 850 8.5 Aug. 221 Aug. 31 810 8.0 Aug. 23 1,005 10.0 Sept. 1 740 7.5 Aug. 24 1,035 10.5

1 Не кормили. 2 Плохое состояние, слизь из прямой кишки.

2 сентября: найден мертвым в 9 часов утра. Вскрытие: слизистая оболочка желудка показала многочисленные геморрагические пятна; начальный отдел тонкой кишки был слегка гиперемирован; остальные органы по виду были нормальными.

Кролик 383. Бельгийский, самка.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса через желудочный зонд.

Date. Weight. Treatment. Date. Weight. Treatment. Grams. cc. Grams. cc. Aug. 16 995 10.0 Aug. 221 Aug. 17 1,005 10.0 Aug. 23 875 9.0 Aug. 18 990 10.0 Aug. 24 855 8.5 Aug. 19 895 9.0 Aug. 25 850 8.5 Aug. 20 945 9.5 Aug. 26 785 8.0 Aug. 21 965 9.5 Aug. 27 710 7.0

1 Не кормили.

28 августа: найден мертвым в 9 часов утра. Вскрытие: легкие, сердце и селезенка по виду нормальные; печень поражена кокцидиями; желудок по виду нормальный; стенки тонкой кишки инъецированы; толстая кишка сильно гиперемирована и геморрагична; почки геморрагичны.

Кролик 387. Бельгийский самец.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса через желудочный зонд.

Date. Weight. Treatment. Date. Weight. Treatment. Grams. cc. Grams. cc. Aug. 17 1,260 12.5 Aug. 26 1,185 12.0 Aug. 18 1,340 13.0 Aug. 27 1,255 12.5 Aug. 19 1,335 13.0 Aug. 281 Aug. 20 1,300 13.0 Aug. 29 1,115 11.0 Aug. 21 1,325 13.0 Aug. 30 1,135 11.5 Aug. 221 Aug. 31 1,175 12.0 Aug. 23 1,205 12.0Sept. 1 1,050 10.5 Aug. 24 1,200 12.0Sept. 2 900 9.0 Aug. 25 1,285 12.5

1 Не кормили.

3 сентября, найден мертвым. Вскрытие: желудок и тонкая кишка показали многочисленные геморрагические пятна; содержимое желудка окружено толстым слоем слизи; мочевой пузырь был сильно растянут мочой; остальные органы были по виду нормальными.

Кролик 388. Бельгийский самец.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса через желудочный зонд.

Date. Weight. Treatment. Date. Weight. Treatment. Grams. cc. Grams. cc. Aug. 17 1,080 10.0 Aug. 23 1,020 10.0 Aug. 18 1,115 11.0 Aug. 24 985 10.0 Aug. 19 1,150 11.5 Aug. 25 960 9.5 Aug. 20 1,130 11.5 Aug. 26 900 9.0 Aug. 21 1,120 11.0 Aug. 27 875 9.0 Aug. 221 Aug. 281

1 Не кормили.

29 августа, найден мертвым в 9 часов утра. Вскрытие: сердце и легкие нормальные; печень и почки полнокровные; желудок нормальный; кишечник показал катаральное воспаление, хотя и не сильное; селезенка нормальная; стенки толстой кишки несколько инъецированы.

Кролик 391. Бельгийский.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса через желудочный зонд.

Date. Weight. Treatment. Date. Weight. Treatment. Grams. cc. Grams. cc. Aug. 17 940 9.5 Aug. 24 805 8.0 Aug. 18 950 9.5 Aug. 25 800 8.0 Aug. 19 955 9.5 Aug. 26 765 7.5 Aug. 20 935 9.5 Aug. 272 690 7.0 Aug. 21 945 9.5 Aug. 281 Aug. 221 Aug. 29 565 5.5

1 Не кормили. 2 Плохое состояние.

30 августа, найден мертвым в 9 часов утра. Вскрытие: сердце инъецировано; легкие нормальные; печень слегка поражена кокцидиями; желудок по виду нормальный; тонкая кишка нормальная, но толстая кишка значительно воспалена; почки слегка полнокровные; остальные органы в норме.

Кролик 402. Черная самка.

Получил 1 куб. см 1-процентного раствора кофеина на каждые 100 граммов веса.

Date. Weight. Treatment. Date. Weight. Treatment. Grams. cc. Grams. cc. Aug. 20 2,030 20.0 Aug. 27 1,765 17.5 Aug. 21 1,950 19.5 Aug. 281 Aug. 221 Aug. 29 1,630 16.5 Aug. 23 1,955 19.5 Aug. 30 1,540 15.5 Aug. 24 1,905 19.0 Aug. 31 1,510 15.0 Aug. 25 1,890 19.0 Sept. 1 1,425 14.0 Aug. 26 1,780 18.0

1 Не кормили.

2 сентября, найден мертвым в 9 часов утра. Вскрытие: легкие были сильно гиперемированы, задняя доля правого легкого показала гепатизацию; печень была значительно увеличена и гиперемирована; слизистая оболочка желудка и тонкой кишки была гиперемирована и показала многочисленные геморрагические пятна; почки показали легкую гиперемию; все остальные органы в норме.

Серия D.

Данные, представленные на предыдущих страницах относительно кумуляции кофеина, естественным образом наводят на вопрос, приобретает ли организм толерантность к нему. На этот вопрос уже был дан утвердительный ответ Гуревичем (28), но из-за метода, который он использовал для идентификации кофеина, и малого количества проведенных экспериментов его результаты не являются окончательными. Эксперименты серий A, B и C можно рассматривать как указывающие на то, что толерантность к кофеину у кролика не вырабатывается. Однако было замечено, что кролик, по-видимому, переносит все большие дозы при определенных условиях, как показывают следующие эксперименты:

Кролик 223. Бельгийский заяц, самец.

October 22: Weight, 1,520 grams; 15 cc 2 per cent caffein injected subcutaneously at 2 p. m.

1 ноября: 10:30 утра, вес 1510 граммов; 17 куб. см 2-процентного раствора кофеина введено подкожно (225 мг на килограмм), наблюдались рефлексы, но тетануса не было.

4 ноября: 10:30 утра, вес 1535 граммов; 19 куб. см 2-процентного раствора кофеина введено подкожно в 2:40 дня; 4:40 дня, симптомов нет.

8 ноября: вес 1425 граммов; 20 куб. см 2-процентного раствора кофеина (285 мг на килограмм) введено в 11:45 вечера; 5 часов вечера, симптомов нет.

November 17: Weight, 1,325 grams; 22 cc 2 per cent caffein injected at 2.55 p. m. (329 mg per kilo), no symptoms.

18 ноября: кролик в хорошем состоянии.

Кролик 224. Бельгийский заяц, самка. Диета: морковь.

October 18: Weight, 1,935 grams; 11.20 a. m., 15 cc 2 per cent caffein (155 mg per kilo) injected.

1 ноября: вес 1780 граммов; 20 куб. см 2-процентного раствора кофеина (224 мг на килограмм) введено подкожно, рефлексы усилены, присутствуют мышечные треморы, но других симптомов нет.

November 4: Weight, 1,710 grams; 21.5 cc 2 per cent caffein (252 mg per kilo) injected.

8 ноября: вес 1435 граммов; 22,5 куб. см 2-процентного раствора кофеина, или 314 мг на килограмм, введено в 11:40 вечера; 5 часов утра, симптомов нет.

November 17: Weight, 1,340 grams; 24 cc 2 per cent caffein (358 mg per kilo) injected subcutaneously.

18 ноября: 9 часов утра, кролик умер.

Кролик 226. Серый самец. Диета: морковь.

28 октября: вес 1045 граммов; 10 куб. см 2-процентного раствора кофеина введено подкожно в 1:50 дня; 4:30 дня, наблюдались треморы, но других симптомов нет.

29 октября: кролик в хорошем состоянии.

November 1: Weight, 950 grams; 10.55 a. m., 11 cc 2 per cent caffein injected subcutaneously (231 mg per kilo).

November 4: Weight, 930 grams; 2.50 p. m., 12 cc 2 per cent caffein injected subcutaneously (258 mg caffein per kilo).

November 6: Weight, 945 grams; 11.45 a. m., 15 cc 2 per cent caffein (313 mg per kilo) injected subcutaneously.

November 17: Rabbit still alive; weight, 890 grams.

Результаты этих экспериментов указывают на то, что при достаточном времени между двумя последовательными инъекциями восприимчивость к кофеину не увеличивается. Кролик, напротив, по-видимому, приобретает толерантность к препарату, так как четвертая доза была на 15 процентов больше минимальной летальной дозы кофеина. Это, по всей вероятности, объясняется лучшим выведением кофеина и продуктов его распада, а также восстановлением после вредного воздействия каждой дозы, что стало возможным благодаря длительным интервалам между инъекциями.

Результаты этих экспериментов можно кратко суммировать, заявив, что сублимиальные дозы кофеина, вводимые кролику ежедневно или с интервалами (не слишком длительными), не вызывают никаких симптомов, подобных тем, что наблюдались при острой интоксикации кофеином, а именно: усиления рефлексов и судорог или увеличения частоты дыхания, что показывает отсутствие кумулятивного эффекта. Однако были получены данные, несомненно свидетельствующие о суммировании эффекта, если введение сублимиальных доз кофеина продолжается ежедневно в течение 11–18 дней, что приводит к летальному исходу. Толерантность, однако, может быть приобретена, хотя и в ограниченной степени, при условии, что интервалы между инъекциями достаточно длительны, чтобы дать время для восстановления повреждений, нанесенных препаратом, и для развития механизма его лучшего разложения и выведения. Более того, приведенные данные указывают на то, что выведение сублимиальных доз кофеина и продуктов его распада, вероятно, завершается в течение 24 часов или около того. То, что выведение больших доз не завершается в этот интервал, делает вероятным следующий эксперимент:

Серый кролик 455. Самка. Диета: овес.

12 октября: вес 1185 граммов; 3:30 дня, 11,5 куб. см 2-процентного раствора кофеина введено в поясничные мышцы; 3 часа дня, рефлексы усилены.

13 октября: 10 часов утра, кролик весил 1070 граммов; симптомов отравления кофеином нет, рефлексы нормальные; 10:30 утра, 10 куб. см 2-процентного раствора кофеина введено в поясничные мышцы; 11:30 утра, кролик спрыгнул со стола, начались судороги, и он умер.

ЭКСПЕРИМЕНТЫ НА СОБАКАХ.

Получив некоторую информацию относительно воздействия повторных доз кофеина на кроликов, было интересно выяснить, как хищники реагируют на препарат при аналогичном введении. Для этой цели использовалось несколько собак. Было допущено значительное разнообразие в методах экспериментирования, как станет ясно далее.

Поскольку состояние животного, его возраст, окружающая среда или диета могут быть факторами, влияющими на токсичность, были проведены тесты на взрослых и молодых растущих собаках с разным питанием. Подопытные животные находились под наблюдением от нескольких дней до нескольких недель до начала введения кофеина, чтобы определить, существует ли какое-либо болезненное состояние, а также выяснить, оказывает ли новая среда какое-либо влияние на этих животных. Кофеин давали преимущественно через рот, но в некоторых случаях в течение части экспериментального периода применялся и подкожный метод. Начальная доза, которая варьировалась для разных особей, поддерживалась в течение переменного периода времени. Затем ее постепенно увеличивали, в большинстве случаев до смерти животного. При больших дозах интервалы между последовательными инъекциями также увеличивались.

Серия A.

В этой серии использовалось шесть собак. Кофеин вводили через рот в течение периодов от шести дней до пяти недель. Его давали ежедневно или с интервалами в два, а иногда и в три дня. В нескольких случаях препарат не давали в течение четырех или даже семи дней, а затем его введение возобновляли по истечении этого времени. Начальная доза в этих экспериментах варьировалась примерно от 40 до 140 мг на килограмм. Затем дозы постепенно увеличивали, проверяя таким образом максимальную устойчивость подопытного к кофеину. Диета состояла либо исключительно из мяса, либо преимущественно из углеводов с минимальным количеством мяса для придания вкуса пище.

Собака 11. Самка.

Диета состояла из 250 граммов риса, 250 граммов тростникового сахара, 50 граммов мяса, около 100 граммов крекерной муки. Кофеин давали через рот ежедневно или с интервалом в один день, когда доза не превышала 1,5 грамма. Перед тем как дозу увеличили до 2 граммов, или примерно 0,213 грамма кофеина на килограмм, был сделан интервал в два дня. Симптомы были замечены на следующий день. Поэтому снова был сделан интервал в два дня, по окончании которого та же доза была повторена. Следует отметить, что в этот раз симптомов не было, и общее состояние собаки казалось хорошим. Поэтому в течение следующих двух дней ежедневно давали по 2 грамма кофеина без каких-либо нежелательных эффектов; затем дозу увеличили до 2,5 граммов. Даже после такого огромного количества не наблюдалось никаких симптомов, кроме легкого тремора. Когда эта доза была повторена 26 часов спустя, она оказалась смертельной. В моче не было обнаружено ни альбумина, ни сахара, хотя собаку кормили очень обильной углеводной диетой. Ниже приводится полная запись эксперимента.

20 апреля: моча кислая, альбумина нет, сахара нет.

21 апреля: моча без сахара.

22 апреля: моча без сахара. 1 грамм кофеина дан во второй половине дня.

23 апреля: 9 часов утра, собака была очень жаждущей, выпила большое количество воды, моча не восстанавливала реактив Фелинга.

April 24: 2.30 p. m., 1 gram caffein, no sugar in urine.

25 апреля: введен 1 грамм кофеина.

26 апреля: вес 10,6 кг, моча собрана утром, сахара нет; 4:10 дня, 1,5 грамма кофеина.

27 апреля: 1,5 грамма кофеина; 1:30 дня, диета как прежде, сахара в моче нет.

28 апреля: вес 10,2 кг, кофеина нет, сахара в моче нет.

April 30: Weight, 10.4 kilos, no sugar in urine; 4.20 p. m., 2 grams caffein.

1 мая: моча исследована, сахара нет, вес 10 кг, рвота, больна, наблюдались треморы, выпила 500 куб. см воды за один раз, аппетит плохой.

2 мая: кофеина нет, выпила 150 куб. см воды.

3 мая: моча, сахара нет, присутствует умеренное количество альбумина; 12 часов дня, 2 грамма кофеина дано через рот, вес 10,3 кг; 2 часа дня, моча, сахар отрицательный, состояние собаки хорошее, симптомов интоксикации кофеином нет.

4 мая: 10 часов утра, в бутылке для сбора найдено около 10 куб. см густой, темного цвета слизистой мочи; альбумина чуть больше следов, определенно меньше, чем 3 мая, сахара нет, состояние собаки довольно хорошее, за исключением легкого мышечного тремора; 4 часа дня, 2 грамма кофеина через рот (как обычно).

May 5: Urine not examined, no symptoms; 4 p. m., 2 grams caffein.

6 мая: моча не исследовалась; 2:30 дня, 2,5 грамма кофеина дано через рот; 4 часа дня, легкий тремор, других симптомов нет.

7 мая: моча не исследовалась, симптомов не наблюдалось; 4 часа дня, 2,5 грамма кофеина.

8 мая: 9 часов утра, найдена мертвой, моча, собранная с момента последней дозы кофеина, не содержала сахара или альбумина, количество кофеина, скормленное этой собаке, составило 18 граммов за 18 дней. Вскрытие: посмертное исследование показало выраженный энтерит с геморрагическими пятнами на слизистой оболочке; печень и почки гиперемированы и темного цвета; легкие гиперемированы; щитовидная железа была значительно увеличена и гиперемирована.

Собака 28.

30 апреля: вес 6,8 кг; диета состояла из 250 граммов риса, 250 граммов сахара, 100 граммов крекерной муки и 100 граммов мяса. 3 мая ее вес был 7 кг. Она получила 1 грамм кофеина через рот в 12 часов дня. В 2 часа дня у нее была рвота и наблюдались треморы. На следующий день, 4 мая, треморы все еще присутствовали, хотя и менее выраженные. Исследование мочи на сахар и альбумин было отрицательным; 4 мая снова дали 1 грамм кофеина и повторили 5 мая. В этот день ее общее состояние было нехорошим — у собаки не было аппетита, и она отказывалась принимать кофеин. Поскольку собака потеряла 10 процентов своего веса, ее перевели исключительно на мясную диету, а дозу кофеина снизили до 0,5 грамма. Она заболела после второй дозы, поэтому введение кофеина было прекращено. Его возобновили через пять дней, и кофеин вводили в возрастающих количествах, т. е. 18 мая — 0,5 грамма; 19 мая — 0,5; 20 мая — 1; 21 мая — 1 грамм в двух дозах по 0,5 каждая, с интервалом в один час; 22 мая — 1 грамм. Собака стала раздражительной, но других симптомов не наблюдалось. На следующий день введение кофеина пропустили. На следующий день, когда дали ту же дозу кофеина, снова наблюдалась выраженная раздражительность и тремор. Поэтому эксперимент был прекращен.

Собака 22. Бульдог, самец.

24 июня: собака весила 13,7 кг. Диета состояла исключительно из мяса; 1 грамм кофеина дан через рот; развилась диарея; кофеин не давали в течение трех дней.

28 июня: собака весила 13,6 кг, 1,5 грамма кофеина дано в 10 часов утра.

30 июня: введено 1,75 грамма кофеина.

2 июля: собака весила 13,5 кг; 2 грамма кофеина, или 0,15 грамма на килограмм, вызвали выраженную жажду, но не вызвали никаких других симптомов.

Собака 20. Самка.

12 мая: вес 7,7 кг. Кормили обильной углеводной диетой, состоящей из 100 граммов риса, 100 граммов сахара, мяса и крекерной муки в количестве, достаточном для придания вкуса пище.

14 мая: вес 7,7 кг. Исследование мочи на альбумин и сахар дало отрицательные результаты. Моча была кислой по лакмусу.

17 мая: вес 7,4 кг. Через три часа после кормления собака получила 0,5 грамма кофеина через рот. Исследование мочи на следующий день на сахар было отрицательным, но присутствовал след альбумина. Будет замечено, что дозы увеличивались постепенно и что симптомы наблюдались только после четвертой дозы 0,1 грамма на килограмм. Позже мясо было заменено углеводной диетой, и введение кофеина было прекращено на четыре дня. По окончании этого периода ежедневно в течение пяти дней скармливали 100 мг кофеина на килограмм, а затем дозу очень постепенно увеличивали. Диарея случалась дважды, но других симптомов не было, причем второй приступ длился несколько дней. Ниже приводится полная запись эксперимента:

19 мая: 0,5 грамма кофеина в 11:45 утра.

20 мая: 0,75 грамма кофеина в 12:45 утра.

21 мая: 0,75 грамма кофеина в 12 часов дня; сахара нет, альбумина в моче нет.

22 мая: 0,75 грамма кофеина; моча, то же состояние; симптомов нет.

23 мая: вес 7,5 кг; кофеина нет.

24 мая: 0,75 грамма кофеина; тремор очень выражен.

25 мая: кофеина нет.

26 мая: 0,75 грамма кофеина.

27 мая: 0,75 грамма кофеина.

28 мая: 0,75 грамма кофеина.

29 мая: 1 грамм кофеина в двух дозах по 0,75 и 0,25 грамма.

30 мая: кофеина нет.

31 мая: кофеина нет; диета исключительно мясная.

1 июня: кофеина нет; диета исключительно мясная.

2 июня: кофеина нет; сахара нет, альбумина в моче нет.

3 июня: вес 7,6 кг; 0,75 грамма кофеина; сахара в моче нет.

4 июня: вес 7,3 кг; 0,75 грамма кофеина; сахара в моче нет.

5 июня: вес 7,5 кг; 0,8 грамма кофеина; выпила 500 куб. см воды; съела 200 граммов мяса.

6 июня: вес 7,4 кг; 0,8 грамма кофеина; 500 куб. см мочи; выпила 500 куб. см воды; съела 200 граммов мяса; симптомов нет.

June 7: Weight, 7.7 kilos; 0.8 gram caffein 10 a. m.; 400 cc urine, 500 cc water, 200 grams meat.

June 8: Weight, 7.5 kilos; 0.9 gram caffein, 450 cc urine, 1 p. m.; 200 grams meat, 500 cc water.

9 июня: вес 7,6 кг; 0,9 грамма кофеина, 1 час дня; 500 куб. см воды, 200 граммов мяса и костной муки; диарея и беспокойство весь день.

June 10: Weight, 7.6 kilos; 1 gram caffein, 500 cc water, 200 grams meat, 480 cc urine.

June 11: Weight, 8 kilos; 1 gram caffein, 470 cc urine, 500 cc water, 200 grams meat.

June 12: Weight, 7.8 kilos; 1 gram caffein, 710 cc urine, 500 cc water, 200 grams meat.

June 13: 450 cc urine, 500 cc water, 300 grams meat.

June 14: Weight, 7.9 kilos; 1.2 grams caffein, 500 cc water, 300 grams meat, 490 cc urine.

June 15: Weight 7.8 kilos, 500 cc water, 300 grams meat, 550 cc urine.

June 16: Weight 8.0 kilos, 1.2 gram caffein, 500 cc water, 300 grams meat, bone dust added to check diarrhea.

June 17: 500 cc water, 300 grams meat, 450 cc urine, diarrhea continues, bone dust added.

June 18. Weight 7.8 kilos, 1.3 gram caffein, 300 grams meat, 500 cc water, 300 cc urine.

19 июня: собака очень жаждущая, выпила 1 литр воды и съела 350 граммов мяса; 960 куб. см мочи выделено за последние 24 часа.

21 июня: вес 7,5 кг, 1,5 грамма кофеина дано в 10 часов утра. В 2 часа дня судороги и смерть. Эта собака получила в общей сложности 21,15 грамма кофеина в 25 дозах в течение 35 дней, что составляет в среднем 85 мг на килограмм ежедневно.

Собака 19. Самка фокстерьера.

13 мая: вес 6,4 кг. Диета состояла из 100 граммов риса, 100 граммов сахара и достаточного количества мяса и крекерной муки для придания вкуса пище. Исследование мочи показало след альбумина, но не сахара. Моча была кислой по лакмусу. Два дня спустя моча была щелочной по лакмусу. Все еще было небольшое количество альбумина, но не сахара.

17 мая: 0,5 грамма кофеина дано через рот. Исследование мочи, собранной на следующий день, все еще показало наличие альбумина и отсутствие восстанавливающих веществ. У собаки были треморы. Поэтому кофеин не вводили.

19 мая: 0,5 грамма кофеина дано через рот.

20 мая: 0,75 грамма кофеина скормлено в 12:45 дня. Собаку рвало ночью, а на следующее утро наблюдались треморы. Собранная моча была исследована на альбумин и сахар, но ни того, ни другого не было найдено.

21 мая: 12 часов дня, скормлено 0,75 грамма кофеина. Собака весила 6 кг, что, таким образом, представляло потерю 0,4 кг. Стала аномально жаждущей и потеряла аппетит, но других симптомов отравления кофеином не наблюдалось.

22 мая: собаке снова дали 0,75 грамма кофеина в 12 часов дня. Исследование мочи на альбумин и сахар дало отрицательные результаты. Собака умерла в 4:15 дня. Летальная доза для этой собаки составила 0,125 грамма кофеина на килограмм, а общее количество кофеина, принятое за шесть дней, составило 3,25 грамма, или 0,54 грамма в день, что составляет 90 мг на килограмм.

Собака 21. Белая самка бульдога.

Эту собаку держали на диете исключительно из мяса и давали воду вволю. От 0,5 до 0,6 грамма кофеина вводили ежедневно в течение семи дней; затем дозы увеличивали и давали с более длительными интервалами. Никаких симптомов воздействия кофеина не наблюдалось до тех пор, пока не была скормлена доза 1,5 грамма, когда на следующий день была замечена диарея. В следующей записи приведены подробности эксперимента:

Date. Weight. Caffein. Date. Weight. Caffein. Kilos. Grams. Kilos. Grams. June 7 12.5 0.5 June 16 12.7 0.8 June 8 12.5 .5 June 18 12.9 1.0 June 9 12.5 .5 June 21 13.4 1.2 June 10 12.3 .6 June 24 13.3 1.5 June 11 12.3 .6 June 25 (1) .0 June 12 12.3 .6 June 27 13.5 1.5 June 13 12.3 .6 June 30 13.5 1.75 June 14 12.3 .8

1 Диарея.

2 июля: 11:30 утра, 2,0 грамма кофеина скормлено через рот; 1:30 дня, тетанус, собака умерла. Общее количество кофеина, скормленное собаке № 21 за 25 дней эксперимента, составило 14,45 грамма, или в среднем 578 мг в день, что составляет около 42–43 мг на килограмм веса тела.

Несмотря на разнообразие методов экспериментирования, наблюдалось поразительное единообразие в некоторых полученных результатах. Все эксперименты серии показали отсутствие кумулятивного действия кофеина. Представленные экспериментальные данные указывают на то, что умеренно большие дозы могут вводиться с интервалами около 24 часов, не вызывая никаких симптомов нервного или какого-либо другого расстройства. Это проиллюстрировано в тестах на собаке 11, которые носили предварительный характер. У этого подопытного 100–150 мг кофеина на килограмм принимались ежедневно в течение нескольких дней без каких-либо изменений. Позже, в ходе эксперимента, после введения больших доз, наблюдались только легкие симптомы, такие как тремор. Дополнительным доказательством отсутствия кумулятивного действия кофеина послужили результаты следующих экспериментов:

Собака 23 получала 142 мг кофеина на килограмм в течение трех последовательных дней. Ее общее состояние указывало на то, что эти количества кофеина были токсичными, но она выжила. В другой серии тестов, проведенных после того, как ей дали отдохнуть несколько дней, она снова не показала никакой кумуляции препарата, так как на этот раз выжила в серии тестов большей продолжительности, чем первая.

Гораздо лучшей иллюстрацией отсутствия кумулятивного действия препарата служат эксперименты на собаке № 20. В этом случае 100–125 мг кофеина на килограмм, данные в течение 10 дней подряд, не вызвали никаких заметных эффектов. Единственными наблюдаемыми симптомами были диарея и беспокойство. Таким образом, эти эксперименты показывают, что выведение и разложение кофеина, по-видимому, осуществляются организмом в течение двадцати четырех часов или около того.

Эксперименты на собаке 19, однако, составляют исключение — третья доза 125 мг кофеина на килограмм оказалась смертельной. Очень низкое содержание белка в диете этой собаки наводит на мысль о возможной причине более низкой устойчивости к кофеину у этого подопытного. Но можно заметить, что такая же диета предоставлялась собаке 20, которая переносила такие количества кофеина гораздо дольше. Наличие следа альбумина в моче собаки 19 также недопустимо в качестве причины разницы в токсичности кофеина у этой собаки, так как моча собаки 20 также содержала след альбумина. Щелочная реакция мочи вместе с тем фактом, что первая доза всего 60 мг кофеина на килограмм вызвала симптомы токсичности, предполагает наличие аномального состояния, которое, по всей вероятности, и стало причиной смерти этого подопытного при указанных условиях.

В большом количестве экспериментов с кофеином, проведенных в этой лаборатории, было замечено, что симптомы, вызванные кофеином, часто исчезали, когда введение той же дозы препарата продолжалось. Так, собаку 19 рвало, когда количество кофеина было увеличено до 125 мг на килограмм. Когда это количество повторили на следующий день, рвоты не было. Аналогичные наблюдения были сделаны на собаках 11 и 23, а также на других собаках. У № 22 сначала развилась диарея; однако, когда введение кофеина было возобновлено несколько дней спустя, диареи не было. В других экспериментах, проведенных в этой лаборатории, симптомы нервной раздражительности, вызванные кофеином, исчезали при продолжении лечения.

Поэтому было интересно узнать, увеличится ли устойчивость к кофеину при продолжении введения все больших количеств препарата. Когда скармливали дозы 150 и выше, интервалы обычно были длиннее 24 часов. Между двумя последовательными дозами разрешалось проходить двум, а иногда и трем дням. Это делалось для того, чтобы дать время для восстановления после возможных изменений, вызванных большими дозами кофеина, и тем самым предотвратить суммирование эффекта. Таким образом, в рассматриваемых экспериментах, №№ 11, 23, 20 и 19, токсичность кофеина, по-видимому, не выше, чем в экспериментах по острой интоксикации кофеином у собаки. Однако предполагалось, что большие начальные дозы или быстрый переход к большим дозам, когда количества, используемые в начале, были малы, могли иметь какое-то отношение к неудаче в достижении заметной степени толерантности. Поэтому эксперимент на собаке 21 был проведен путем введения от 40 до 60 мг на килограмм в течение восьми дней, а затем увеличения дозы, но толерантность не удалось вызвать, как показано в протоколе эксперимента.

Серия B.

Согласно исследованиям Читтендена (16), низкобелковая диета улучшает общий метаболизм организма, утомляемость уменьшается, а жизненная энергия, следовательно, соответственно увеличивается. Поэтому оправдано ожидание, что защита организма от вредных веществ, вводимых в тело, значительно улучшается при такой диете, тем самым повышая его устойчивость к ядам. Эксперимент Ханта на эту тему, также цитируемый Читтенденом, подтверждает этот взгляд. Он обнаружил, что мыши, которых кормили преимущественно углеводами или продуктами, содержащими лишь небольшое количество белка, были более устойчивы к ацетонитрилу. Поэтому было интересно узнать, отличается ли токсичность кофеина при аналогичных условиях диеты.

Для всех собак этой серии была предусмотрена фиксированная диета той же калорийности, но содержание белка для трех животных составляло примерно одну треть от количества, обычно скармливаемого собакам. Кофеин сначала вводили подкожно, но у всех собак на низкобелковой диете развились абсцессы в месте инъекции, в то время как ни у одной из собак на высокобелковой диете не наблюдалось местной реакции. Затем начали кормление через рот, которое в каждом случае продолжалось на протяжении всего эксперимента. Начальная доза составляла 50 мг на килограмм, которую давали ежедневно в течение семи-девяти дней. Затем ее постепенно увеличивали на 25 мг на килограмм; 75 мг на килограмм вводили в течение одного-двух дней, 100 мг — в течение двух-трех дней, 125 мг — в течение одного-двух дней, 150 мг — в течение одного-двух дней и однократную дозу 175 мг. Будет замечено, что иногда приходилось делать интервал в один день, в течение которого кофеин не скармливали.

Собака 30. Черно-подпалая гончая, самец.

Собака находилась под наблюдением около восьми недель до начала эксперимента и получала высокобелковую диету. Затем ей давали 50 мг кофеина в течение девяти дней подряд. На десятый день дозу увеличили до 75 мг на килограмм. Поскольку симптомы не развились, эту дозу увеличили до 100 мг на килограмм и скармливали через день. Затем ее повысили до 125 мг на килограмм. Впервые с момента начала скармливания препарата появились симптомы; они были замечены через несколько часов после кормления и сохранялись в течение следующего дня. Хотя аппетит был хорошим, в этот день кофеин не давали. На следующий день эту дозу повторили. Поскольку симптомы не были серьезными, 150 мг на килограмм давали ежедневно в течение следующих трех дней, пока не дошли до 175 мг на килограмм. Эта доза оказалась смертельной в течение шести часов. Ниже следует запись эксперимента:

9 октября: вес 9 кг, на полной азотной диете, получал ежедневно 0,724 грамма азота на килограмм или 87 калорий на килограмм, получал 18 граммов мяса на килограмм, 4 грамма сала на килограмм, 3 грамма углеводов на килограмм, костную муку вволю.

3 ноября: вес 9,10 кг.

November 10: Weight, 9 kilos.

20 ноября: вес 9,55 кг.

29 ноября: вес 8,70 кг.

6, 7, 8 и 9 декабря: получил подкожно 22 куб. см 2-процентного раствора кофеина. Состояние хорошее, место инъекции нормальное.

10, 11, 12, 13 и 14 декабря: получил 0,4375 грамма кофеина через рот, что равно 0,050 грамма на килограмм, симптомов нет, аппетит и общее состояние хорошие.

15 декабря: 11:30 утра, получил 0,6563 грамма кофеина через рот, или 0,75 грамма на килограмм, симптомов нет, аппетит хороший, состояние отличное.

16 декабря: 11 часов утра, получил 0,870 грамма кофеина через рот, или 0,1 грамма на килограмм, вес 8,70 кг, симптомов нет.

17 декабря: кофеин не давали.

18 декабря: получил 0,870 грамма кофеина, или 0,1 грамма на килограмм, симптомов нет.

20 декабря: 2:45 дня, получил 1,0875 грамма кофеина, или 0,125 на килограмм; 4 часа дня, ел пищу охотно, казался очень некомфортно и больным.

21 декабря: 9 часов утра, скованность в мышцах, но других симптомов нет, аппетит хороший, кофеин не давали.

22 декабря: 11 часов утра, получил 1,0875 грамма кофеина, или 0,125 грамма на килограмм; 3 часа дня, подавленное настроение и болен, но других симптомов не наблюдалось.

23 декабря: 11:30 утра, получил 1,305 грамма кофеина, или 0,150 грамма кофеина на килограмм; 1:30 дня, по-видимому, довольно болен, но других симптомов нет, аппетит хороший.

24 декабря: 10 часов утра, получил 0,175 грамма кофеина на килограмм; 4 часа дня, когда собирались кормить, упал и умер; вскрытия не было.

Общее количество кофеина, данное собаке 30, составило 11,3458 грамма, вводимых в течение восемнадцати дней. Среднее суточное количество на килограмм составило, таким образом, 72 мг. Фекалии стали зловонными, когда количества кофеина были увеличены до 75 мг на килограмм. Будет замечено, что у этой собаки аппетит был неизменно хорошим до дня смерти. Является ли это причиной ее устойчивости к кофеину, будет обсуждаться позже.

Собака 32. Белый, самец, молодой.

Хотя он быстро рос, вес этой собаки был постоянным, но выглядел он анемичным. Он получал высокобелковую диету до 3 декабря, когда рацион был увеличен на одну треть. Эта собака находилась под наблюдением с 26 октября по 6 декабря, когда было начато введение кофеина. Затем он получал 50 мг кофеина на килограмм ежедневно в течение девяти дней подряд, не проявляя никаких эффектов, после чего дозу увеличили до 75 мг на килограмм, затем до 100 мг на килограмм. Эту дозу далее увеличили до 150 мг на килограмм, не вызывая симптомов, что повторили на следующий день. Поскольку после таких количеств кофеина симптомов не наблюдалось, скормили 175 мг на килограмм. Эта доза, однако, оказалась смертельной в течение двух часов. Ниже следует запись эксперимента:

26 октября: вес 6,90 кг.

3 ноября: вес 6,90 кг.

10 ноября: вес 6,90 кг.

20 ноября: вес 6,90 кг.

29 ноября: вес 6,55 кг.

3 декабря: помещен в клетку, диета увеличена на одну треть.

6, 7, 8, 9 декабря: вес 6,30 кг; 12:30 дня, получил 16 куб. см 2-процентного раствора кофеина путем подкожной инъекции в спину, никаких симптомов какого-либо рода не замечено, место инъекции нормальное.

10, 14 декабря: 0,05 грамма кофеина на килограмм.

15 декабря: получил 0,4725 грамма кофеина через рот, симптомов нет.

16 декабря: получил 0,655 грамма кофеина, 0,100 грамма на килограмм.

17 декабря: кофеин не давали.

18 декабря: получил 0,655 грамма кофеина ежедневно, 0,100 грамма на килограмм, симптомов нет.

20 декабря: получил 0,8188 грамма кофеина, 0,125 грамма на килограмм, симптомов нет, аппетит хороший.

21 декабря: получил 0,9825 грамма кофеина, 0,150 грамма на килограмм, несколько некомфортно, других симптомов нет.

22 декабря: получил 0,9825 грамма кофеина, 0,150 грамма на килограмм, симптомов нет, кроме некоторого беспокойства.

23 декабря: 9 часов утра, симптомов нет, аппетит хороший; 11:30 утра, получил 1,146 грамма кофеина, 0,1759 грамма на килограмм; 1:30 дня, умер, пытаясь выбраться из клетки, перед смертью наблюдалось тоническое сокращение конечностей.

Количество кофеина, полученное за весь экспериментальный период, составило 9,2223 грамма, или в среднем около 80 мг на килограмм в день, и, следовательно, на 10 процентов больше, чем получила собака № 30. Будет замечено, что аппетит у собаки № 32 был также неизменно хорошим и что она получала очень высокобелковую диету, которая также была очень высокой калорийности.

Вскрытие (собака 32). — Желудок показал тяжелое воспаление слизистой оболочки, особенно в области дна и пилорических отделов. Гастрит был более выражен в пилорическом отделе, и воспалительное состояние распространялось вдоль всего хода тонкой кишки, которая показала многочисленные геморрагические участки и толстый катаральный экссудат на слизистой оболочке. Толстая кишка содержала довольно большое количество паразитов, вероятно, круглых червей. Печень была увеличена, а желчный пузырь хорошо наполнен. Селезенка была также значительно полнокровной, почки выглядели нормально, остальные органы все выглядели нормально.

Собака 31. Черный спаниель, самец.

Эта собака находилась под наблюдением один месяц до экспериментов с кофеином. Затем в течение девяти дней вводилась обычная начальная доза. При подкожном введении препарата признаков местного раздражения не было, но присутствовали симптомы токсичности. Они, однако, исчезли, когда препарат вводили через рот. Поэтому дозу увеличили до 75 мг на килограмм. Это, как будет видно, оказалось смертельным в течение шести часов. Высокоазотистая диета, такая же, как у № 30.

3 ноября: вес 10,250 кг.

10 ноября: вес 10,25 кг.

20 ноября: вес 10,30 кг.

1 декабря: помещен в клетку.

6, 7, 8, 9 декабря: вес 10,20 кг; получил 26 куб. см 2-процентного раствора кофеина подкожно, место инъекции нормальное.

6 декабря: очень беспокойный и возбужденный, скулил, когда его трогали, как будто мышцы болели, казался больным.

10–14 декабря: состояние хорошее, получал 0,51 грамма кофеина через рот ежедневно, примечательных симптомов нет, аппетит остается хорошим, временами несколько беспокоен.

15 декабря: 11:30 утра, получил 0,765 грамма кофеина через рот (0,075 грамма на килограмм); 2 часа дня, подавленное настроение, казался больным и некомфортно; 4:15 дня, когда собирались кормить, животное подпрыгнуло, а затем упало замертво.

Вскрытие (собака 31): легкие гиперемированы; сердце наполнено кровью и содержало небольшое количество окрашенной кровью жидкости в перикардиальном мешке. Печень глубоко гиперемирована, мягкая и дряблая; желчный пузырь растянут желчью; почки показали воспаление коры; селезенка бледная, нормального размера и консистенции; желудок практически пуст, слизистая оболочка пилорического отдела показала тяжелый гастрит с толстым катаральным экссудатом. Это катаральное воспаление распространялось через двенадцатиперстную кишку; оставшаяся часть тонкой кишки показала легкое воспаление; толстая кишка выглядела практически нормальной. Общее количество кофеина, полученное собакой 31 за 10 дней, составило 5,395 мг, или суточное среднее 53,9 мг на килограмм. Эта необычно низкая устойчивость к кофеину (что было практически единственным случаем во всех экспериментах на собаках, представленных в этом исследовании) предполагает наличие какого-то аномального состояния. Кровавый экссудат в перикардиальной полости, указывающий на перикардит, который, вероятно, вызывает вторичные изменения сердечной мышцы, может рассматриваться как возможная причина повышенной токсичности кофеина в этом случае.

Собака 29. Самец фокстерьера, черный.

Эту собаку держали на диете с низким содержанием азота почти пять недель, прежде чем начали давать кофеин. Затем в течение восьми дней вводили по 50 мг кофеина на килограмм массы тела, при этом никаких симптомов токсичности не наблюдалось. После этого дозу увеличили до обычного уровня — 75 мг на килограмм, что привело к проявлению симптомов. Однако дальнейшее увеличение до 100 мг на килограмм не дало видимого эффекта. Тем не менее было сочтено целесообразным приостановить введение кофеина на один день. Затем те же дозы повторяли в течение двух дней подряд. Поскольку симптомов не наблюдалось, ввели 125 мг на килограмм. Так как наблюдались симптомы токсичности, особенно потеря аппетита, на следующий день кофеин собаке не давали. Поскольку аппетит улучшился, эксперимент с более высокими дозами был возобновлен. Смерть наступила после второй дозы 150 мг на килограмм. Ниже приводится протокол:

Масса 9,90 кг. Диета с одной третью азота. Получает 0,269 г азота на килограмм (88,269 калории на килограмм).

3 ноября: масса 9,85 кг.

10 ноября: масса 9,55 кг.

12 ноября: масса 9,40 кг.

29 ноября: масса 9,85 кг.

6 декабря: масса 9,90 кг; 11:35, получено 25 см³ 2-процентного раствора кофеина путем подкожной инъекции в спину; 16:00, симптомов нет, аппетит хороший.

7–9 декабря: получено 25 см³ 2-процентного раствора кофеина — подкожная инъекция, симптомов нет, место инъекции воспалено и отечно.

10, 13 декабря: место инъекции показало усиление воспаления, ежедневно получал 0,495 г кофеина (50 мг на килограмм) с 30 г мяса без проявления каких-либо симптомов.

14 декабря: 12:00, получено 0,7425 г кофеина перорально (0,075 на килограмм); 14:30, беспокойство и тревога.

15 декабря: 11:30, получено 0,7425 г кофеина перорально; 14:00, подавленное состояние, хотя аппетит остается хорошим.

16 декабря: масса 9,50 кг; 15:15, получено 0,9509 г кофеина перорально; 16:50, симптомов нет.

17 декабря: животное отдыхало.

18 декабря: получено 0,950 г кофеина перорально, симптомов нет.

19 декабря: получено 0,9509 г кофеина перорально, симптомов нет.

20 декабря: 14:45, получено 1,1875 г кофеина (0,125 г на килограмм); 16:00, беспокойство и явное недомогание; съел лишь немного пищи.

21 декабря: 9:00, все еще чувствует себя некомфортно, оставлен отдыхать, кофеин не давали, аппетит постепенно восстановился.

22 декабря: 11:00, получено 1,875 г кофеина; 15:00, выглядел больным, но других симптомов не проявлял, аппетит удовлетворительный.

23 декабря: 9:00, симптомов после предыдущего дня не наблюдалось, пищу ел постепенно, выглядел больным; 11:30, получено 1,425 г кофеина (0,150 г на килограмм); 13:30, выглядел и вел себя как очень больной, других симптомов нет; 15:45, при попытке выбраться из ящика упал на спину, начались судороги, скулил, одышка, смерть в течение 30 секунд.

Вскрытие: желудок демонстрировал легкое воспаление; тонкая кишка воспалена, на слизистой оболочке геморрагические участки; печень полнокровная и дряблая; селезенка в норме; почки слегка гиперемированы; остальные органы выглядели нормально. Общее количество кофеина, скормленного собаке 29, составило 12,135 г, что было введено за 18 дней. Таким образом, среднее суточное количество на килограмм составило 67,68 мг.

Собака 28. Самец фокстерьера.

Диета с низким содержанием азота была начата примерно за четыре недели до начала кормления кофеином; затем в течение семи дней подряд скармливали по 50 мг кофеина. После первой дозы наблюдалась частичная потеря аппетита. По мере продолжения эксперимента желание есть неуклонно уменьшалось, а фекалии стали зловонными. Симптомы интоксикации проявились рано, а после четвертой дозы возникла рвота. Затем собаку перевели на диету, состоящую исключительно из мяса. После 10-дневного перерыва дали 109 мг кофеина на килограмм. Поскольку симптомов не было, на следующий день количество увеличили до 125 мг на килограмм. Эта доза оказалась смертельной в течение 16–20 часов.

Эта собака была крепкой и сильной, масса 12,25 кг, получала ежедневно 0,269 г азота на килограмм (88,269 калории на килограмм).

3 ноября: масса 11,75 кг.

10 ноября: масса 11,95 кг.

20 ноября: масса 11,20 кг. Весь этот период содержалась в холодном, плохо проветриваемом помещении, переведена в теплое помещение с подстилкой и хорошей вентиляцией.

29 ноября: масса 11,95 кг.

1 декабря: помещена в клетку; масса 11,95 кг.

6 декабря: масса 11,95 кг; 11:45, получено 0,050 г кофеина на килограмм; затем получено 30 см³ 2-процентного кофеина (0,6 г) практически одной подкожной инъекцией; 16:30, съел только часть пищи.

7 декабря: 10:25, получено 30 см³ 2-процентного кофеина путем подкожной инъекции (0,6 г, или 50 мг, на килограмм); 13:45, казался чувствительным к прикосновениям, отсутствие желания есть, подавленное состояние.

8 декабря: 11:40, получено 30 см³ 2-процентного кофеина путем подкожной инъекции (50 мг на килограмм); 13:00, подавленное состояние, задние ноги казались несколько скованными, отсутствие желания есть обычную пищу, место инъекции воспалено.

9 декабря: 10:50, получено 30 см³ 2-процентного кофеина путем подкожной инъекции (50 мг на килограмм); 14:30, была рвота, отсутствие желания есть обычную пищу.

10 декабря: воспаление места инъекции и отек очень выражены; 14:00, получено 0,5975 г кофеина, или 50 мг на килограмм, с 30 г мяса, отказался от обычной пищи.

11, 12 декабря: получено 0,5975 г кофеина перорально, симптомов нет, кроме отказа от обычной пищи, фекалии зловонные.

13–22 декабря: переведен исключительно на мясную диету, высокая температура, кофеин не давали, масса 10 кг, аппетит хороший, фекалии зловонные.

22 декабря: 12:00, масса 11 кг, получено 1,2 г кофеина перорально (0,109 г на килограмм); 16:00, симптомов нет.

23 декабря: 11:30, получено 1,375 г кофеина (0,125 г на килограмм), была рвота пищей предыдущего дня, но в рвотных массах не удалось обнаружить кофеин или капсулы; 16:30, симптомов нет, казался в хорошем настроении, аппетит хороший, мяса для кормления не было, поэтому дали корм с низким содержанием азота, которого он съел около четверти.

24 декабря: 9:00, найден мертвым, окоченевшим и холодным. Наиболее поразительным эффектом кофеина у этой собаки является усиление кишечного гниения. Фекалии оставались зловонными еще 10 дней после прекращения введения кофеина.

Вскрытие, собака 28: желудок частично заполнен непереваренной пищевой массой; слизистая оболочка демонстрировала сильное воспаление; тонкие кишки представляли собой геморрагический энтерит на всем протяжении; толстая кишка также демонстрировала легкое воспаление; печень была полнокровной; селезенка выглядела нормально; почки слегка гиперемированы в корковом слое; остальные органы выглядели нормально.

Собака 24. Бело-рыжий самец: был переведен на диету с низким содержанием белка за шесть недель до начала экспериментов с кофеином. Затем в течение восьми дней подряд вводилась начальная доза 50 мг на килограмм. Единственными симптомами, наблюдавшимися в этот период введения кофеина, были симптомы кишечного гниения. Зловонные фекалии были замечены уже после первой инъекции кофеина. Когда вторая доза 75 мг кофеина была повторена, появились легкие симптомы, но даже при увеличении количества кофеина других симптомов не наблюдалось.

Диета с одной третью азота. Получал ежедневно 0,269 г азота на килограмм (88,269 калории на килограмм).

26 октября: масса 11,15 кг. Пища состояла из 5 г крекерной муки на килограмм; мяса, 3 г на килограмм; сала, 2 г на килограмм; тапиоки, 10,69 г на килограмм. Содержался в холодном, сыром помещении с плохой вентиляцией до 20 ноября.

November 3: Weight, 11 kilos.

10 ноября: масса 10,75 кг.

20 ноября: масса 10,55 кг; переведен в теплое помещение с подстилкой и хорошей вентиляцией.

29 ноября: масса 10,85 кг.

1 декабря: помещен в клетку.

6 декабря: масса 10,90 кг; 11:25, получено 28 см³ 2-процентного кофеина подкожно в бок, ниже лопаток, область промыта спиртом и эфиром, введено примерно 50 мг на килограмм, симптомов нет.

7 декабря: 10:15, получено 28 см³ 2-процентного кофеина путем подкожной инъекции; фекалии мягкие и очень зловонные; 13:00, подавленное состояние, глаза тусклые.

9 декабря: 10:45, получено 25 см³ 2-процентного раствора кофеина подкожно, фекалии все еще зловонные, место инъекции воспалено и отечно, других симптомов нет.

10 декабря: воспаление области инъекции более выражено; 14:00, дано 0,5449 г кофеина и 30 г мяса; 16:00, покормлен, симптомов нет, фекалии зловонные.

11 декабря: 12:00, дано 0,5459 г кофеина и 30 г мяса, симптомов нет, фекалии зловонные.

12, 13 декабря: давали по 0,5459 г кофеина ежедневно, не заметив никаких симптомов.

14 декабря: 12:00, получено 0,817 г кофеина (75 мг на килограмм); 14:30, беспокойство и дискомфорт, других симптомов нет.

15 декабря: 11:30, получено 0,8175 г кофеина перорально; 14:00, подавленное состояние, вел себя как больной, других симптомов нет.

December 16: Weight, 11 kilos; 11 a. m., received 0.100 gram caffein per kilo (1.100 grams) by mouth, no symptoms.

17 декабря: отдыхал.

18 декабря: 14:30, получено 1,100 г кофеина перорально; 16:00, симптомов нет.

19 декабря: 12:00, получено 1,100 г кофеина перорально; 16:15, симптомов нет.

20 декабря: 14:45, дано 1,375 г кофеина (0,125 г на килограмм); 15:45, рвота — одна из капсул найдена неповрежденной, другая вскрыта; 16:00, дана обычная диета, содержащая 1,3757 г кофеина в капсулах, съел большую часть этого за ночь, периодически скулил, координация нарушена, выглядел очень больным, но других симптомов не проявлял.

21 декабря: 9:00, найден мертвым, окоченевшим и холодным.

Общее количество кофеина, полученного собакой 24, составило от 10,109 до 11,484 г. Поскольку одна из капсул, вышедших при рвоте, была неповрежденной, а другая вскрытой, количество составило, вероятно, около 10,75 г. Смертельная доза в данном случае была, несомненно, менее 185 мг на килограмм — где-то между 125 и 185 мг. Вскрытие показало сердце в диастоле; задняя доля правого легкого глубоко гиперемирована; печень полнокровная; желчный пузырь наполнен; селезенка выглядела нормально; желудок хорошо заполнен полужидкой массой; пилорическая часть желудка демонстрировала сильное воспаление слизистой оболочки; слизистая оболочка двенадцатиперстной кишки сильно воспалена и имела геморрагические участки и катаральный экссудат; остальная часть тонкой кишки также демонстрировала легкое воспаление; почки глубоко гиперемированы, брыжейка инъецирована.

Сравнение смертельных доз кофеина в экспериментах на диете с высоким и низким содержанием белка не показывает большой разницы в устойчивости к кофеину, поскольку 175 мг на килограмм оказались смертельными для № 30 и 32, в то время как № 29 умер после получения 150 мг на килограмм, а № 24 получил от 125 до 185 мг на килограмм. Более того, № 28, который был переведен с диеты с низким содержанием белка на диету с высоким содержанием белка, погиб при получении 125 мг на килограмм. Однако наблюдения, сделанные в течение экспериментального периода, указывают на большую токсичность кофеина у субъектов на диете с низким содержанием белка. Собака 30 показала эффекты препарата, когда доза была увеличена до 125 мг кофеина на килограмм, в то время как у № 32 150 мг на килограмм были получены без какого-либо проявления симптомов. Собака 31, которая также была на диете с высоким содержанием белка, очевидно, является исключением, и ее низкая устойчивость к кофеину может быть объяснена состоянием, обнаруженным при вскрытии. У других собак на диете с низким содержанием белка симптомы интоксикации появлялись рано в ходе эксперимента. У № 29 и 24 это наблюдалось, как только количество кофеина увеличивалось до 75 мг на килограмм. У собаки 28 первая доза кофеина 50 мг на килограмм была токсичной. Симптомы желудочно-кишечного расстройства были особенно выражены после кофеина на диете с низким содержанием белка. Это может показаться противоречащим результатам экспериментов на собаках 11 и 20, в которых большие дозы кофеина не вызывали симптомов интоксикации. Но следует отметить, что диета, состоявшая почти исключительно из углеводов, давалась только во время введения кофеина, тогда как в экспериментах серии B субъекты получали диету с низким содержанием белка в течение нескольких недель до начала введения кофеина, и она продолжалась в течение всего периода введения кофеина. Будет отмечено, что отсутствие кумулятивного действия в экспериментах предыдущей серии наблюдалось также у собак как на диете с высоким, так и на диете с низким содержанием белка. Появление симптомов после меньших доз кофеина в последних экспериментах могло бы указывать на кумулятивное действие, но поскольку эти симптомы исчезали при продолжении введения вещества, кумуляция явно не показана. Желудочно-кишечные поражения, наблюдавшиеся при патологоанатомическом исследовании, были, как можно вспомнить, также обнаружены у кроликов, получавших аналогичное лечение. Предложенное объяснение, вероятно, применимо и в случае с собаками.